Фбс 5 блок размеры: цена, вес, объем, размеры, где купить

Фбс 5 блок размеры: цена, вес, объем, размеры, где купить

Содержание

Размеры и вес фундаментных блоков ФБС по ГОСТу, применение и характеристики

Из названия понятно, что фундаментные блоки  используются для строительства основания здания. Как правило, чаще всего, особенно при индивидуальном строительстве, выбирается ленточный тип фундамента, так как он позволяет оборудовать полноценное подвальное помещение, пригодное к использованию в различных целях. Кроме того, по оценкам специалистов, монтаж фундаментных блоков в среднем обходится на 2 000 руб/м3 дешевле, чем сооружение опалубки и изготовление монолита заливкой бетонного раствора.

Когда целесообразно применять ФБС

  • При наличии свободного пространства на строительной площадке. Блоки имеют значительный вес, и их перемещение вручную невозможно. Поэтому придется использовать подъемный кран.
  • При дефиците времени. Сборный фундамент монтируется быстро, необходимо лишь подготовить место под закладку блоков. В то же время для сооружения монолитного ленточного основания необходимо возвести ограждение (опалубку), изготовить арматурный «скелет», замесить и залить раствор, принять меры для его подогрева и ждать, когда бетон отвердеет.
  • При проведении работ в неблагоприятных погодных условиях (например, осенью, в период интенсивного выпадения осадков), которые затрудняют изготовление фундамента способом заливки.
  • При недостаточной квалификации работников. Сооружение монолита требует знаний и опыта, а установка блоков в траншею сложностей не представляет.
  • Если по своему исполнению лента будет делаться не сплошной, а прерывистой. Этот вид фундамента дает дополнительную экономию на материалах. 

Характеристики блоков

Такие характеристики фундаментных блоков, как размер и вес, находятся в прямой взаимосвязи. Их изготовление регламентировано Государственными Стандартами. Например, для фундаментных изделий – ГОСТ 13579 от 1978 года.

В соответствии с ним, длина блоков лежит в пределах 0,8 – 2,4 м; ширина 0,3 – 0,5 м; высота 0,3 – 0,6 м. Вес фундаментных блоков – от 340 кг до 2 т.

Все блоки имеют наименование в соответствие с артикулом. Например, изделие 8-3-6 выпускается с такими характеристиками (длина х ширина х высота) в «м» – 0,8 х 0,3 х 0,6. Приблизительная стоимость – 740 руб/шт.

 Понятно, что при таком обозначении цифры в наименовании продукции обозначают ее габариты, выраженные в «дм». Аббревиатура расшифровывается: «Ф» – фундаментный; «Б» – блок; «С» – сплошной.

Например, изделие ФБС 24-5-3 соответствует размерам 2,4 х 0,5 х 0,3 м, имеет вес 800 кг и стоит порядка 920 руб/шт.

В продаже имеются ж/б фундаментные блоки различных производителей. Поэтому могут несколько отличаться как типовыми размерами, так и маркой использованного бетона.

Для М100 (класса 7,5) можно привести такие данные:

  • длина – от 78 см до 2,38 м;
  • ширина – от 30 до 60 см;
  • высота – от 30 или 58 см.
  • Вес – от 320 кг до 1,96 т.
  • Цена в пределах 445 – 2 670 руб/шт.

Рекомендация

Нужно стараться использовать блоки большей длины. Тогда сократится количество их стыков, снизится объем работ по монтажу, герметизации швов. А если учесть, что придется оплачивать каждый час использования крана, это ощутимо удешевит строительство.

Фундаментные блоки ФБС | ЗАО Завод ЖБИ «Степной» г.Оренбург

Выпускаются по ГОСТ 13579-78 «Блоки бетонные для стен подвалов. Технические условия».

Пример условного обозначения:
ФБС24.3.6-Т

ФБС — фундаментный блок сплошной,
24 — длина в дм. округленная до целого числа (2380 мм),
3 — ширина в дм. округленная до целого числа (300 мм),
6 — высота в дм. округленная до целого числа (580 мм),
Т — тяжелый бетон.

Фундаментные блоки типа ФБС изготавливаются из тяжелого бетона класса по прочности на сжатие В7,5 (ближайшая марка М100). Возможно изготовление ФБС из высокомарочного бетона при условии увеличения стоимости изделия.

Фундаментные блоки типа ФБС12.3.6-Т, ФБС12.3.3-Т, ФБС8.3.6-Т, ФБС8.4.6-Т,  ФБС8.5.6-Т, ФБС8.6.6-Т,  ФБС6.3.6-Т, ФБС6.4.6-Т, ФБС6.5.6-Т,  ФБС6.6.6-Т являются дополнительными типоразмерами блоков ФБС к ГОСТ 13579-78 «Блоки бетонные для стен подвалов. Технические условия.»

Блоки предназначены для стен подвалов и технических подпольев зданий, допускается применять для фундаментов.

Фундаментные блоки — востребованная в мало/многоэтажном строительстве железобетонная продукция. Трудно переоценить значимость надежного фундамента, поэтому к производителям фундаментных блоков предъявляются особые требования к качеству реализуемой продукции. Выполняя важную функцию распределения нагрузки от веса зданий на основания, фундаментные блоки должны быть прочны, долговечны, устойчивы. Для изготовления блока используют качественные бетоны тяжелых марок, позволяющие изделиям справляться с большими нагрузками без образования трещин и других видов разрушений.

Выбор геометрических размеров блоков, а также их сечений, зависит от условий эксплуатации будущего здания, расчетных нагрузок и степени ответственности сооружения. При строительстве в районах, расположенных в холодных климатических зонах, имеет смысл выбирать ФБС с улучшенными характеристиками морозостойкости. Разумеется, наличие качественных добавок, улучшающих подобные параметры бетона, негативно скажется на цене конечной продукции, однако спешим напомнить, что фундаментные блоки являются базисом возводимого здания, и при их выборе в первую очередь следует руководствоваться соображениями безопасности, и только потом финансовой выгоды. При монтаже ФБС, зачастую в качестве подстилающего слоя используются фундаментные подушки, позволяющие увеличить несущую способность фундамента.

Все ФБС в обязательном порядке подлежат пропарке для целей ускорения набора прочности.

И те, и другие железобетонные изделия вы можете купить в компании ЗАО Завод ЖБИ «Степной», по адресу: г. Оренбург, ул. Техническая, 4. Стоимость нашей продукции соразмерна ее высокому качеству, обусловленному многолетним стажем работы наших специалистов, а также использованием новейшего и самого технологичного оборудования. Мы стремимся удовлетворить все нужды наших клиентов, предлагая им надежные фундаментные блоки, а также другие железобетонные изделия в широком ассортименте.

Фундаментные блоки ФБС — сортамент, вес, размеры

Сортамент ФБС (фундаментные блоки стеновые)

Марка фундаментного блока Вес, т Размер фундаментного блока, мм
ФБС 24-3-6т 0,975 2380x300x580
ФБС 24-4-6т 1,3 2380x400x580
ФБС 24-5-6т 1,63 2380x500x580
ФБС 24-6-6т 1,96 2380x600x580
ФБС 12-3-6т 0,49 1180x300x580
ФБС 12-4-6т 0,64 1180x400x580
ФБС 12-5-6т 0,814 1180x500x580
ФБС 12-6-6т 0,98 1180x600x580
ФБС 9-3-6т 0,326 880x300x580
ФБС 9-4-6т 0,468 880x400x580
ФБС 9-5-6т 0,51 880x500x580
ФБС 9-6-6т 0,7 880x600x580
ФБС 12-4-3т 0,31 1180x400x280
ФБС 12-5-3т 0,38 1180x500x280
ФБС 12-6-3т 0,46 1180x600x290

Монтаж фундаментных блоков

Фундаментные блоки монтируются на 3 вида основания.

  • Сборные плиты ленточного фундамента
    Эти плиты маркируются индексом ФЛ и вместе со стеновыми блоками являются элементами сборного фундамента. Плиты фундамента укладываются на ровное уплотненное основание с выполненной гидроизоляцией.
  • Монолитная подушка под фундамент
    По уплотненной поверхности грунта с втрамбованным песком или щебнем выполняется бетонная монолитная подушка толщиной не менее 300 мм. В случае армирования, она выполняет функцию пояся жесткости. Эта подушка может быть шире блоков ФБС и выполнять роль ленточного фундамента с уширением.
  • Щебеночно-песчаное основание
    Фундаментные блоки монтируются на уплотненный слой песка или щебня толщиной 8-10 см. Перед монтажом, уплотненная поверхность проливается битумом для устройства горизонтальной гидроизоляции блока.

ФБС укладываются на цементно-песчаный раствор или бетон. Вертикальные швы заполняются бетоном. Для более надежного замоноличивания стыков ФСок, их торцы выполнены с углублениями для устройства бетонных замков. Для монтажа ФБС необходим автокран и бригада из 5-ти человек. Это из практических соображений, возможно, по технологии процесса требуется больше рабочих. Дело в том, что для укладки фундаментного блока нужно выполнить объемную постель из раствора или бетона. Даже при незначительном удалении смеси от места монтажа, это тяжелая работа. Поэтому в то время как 2 человека и кран задействованы на монтаже, 3 и более рабочих выполняют слой раствора или бетона под очередной блок фундамента.

Швы между блоками выполняются шириной до 40 мм. Для обеспечения устройства швов, длина и высота блоков меньше проектной на 20 мм. После сборки стены фундамента и замоноличивания замков, выполняется вертикальная гидроизоляция фундамента из обмазочных или оклеечных материалов.

Кроме сортаментов материалов для строительства фундаментов загородных домов у нас есть сборные плиты перекрытия.

Фундаментные блоки ФБС: назначение, характеристики, ассортимент


Производственные возможности завода ЖБИ-4 обусловили широту представляемого ассортимента. Компания предлагает не только блоки ЖБИ для обустройства коммуникационных систем и благоустройства территорий, но и популярные строительные материалы, одним из которых являются фундаментные блоки ФБС. Эти ЖБИ часто используются в строительстве при необходимости возведения особо прочного фундамента и надежных, толстых стен.

Применяя ФБС как блоки стен для подвалов, можно обустроить добротные, многофункциональные служебные помещения. Помимо подвалов фундаментные блоки активно используются при возведении стен производственных помещений и зданий самого разного назначения небольшой этажности.

Железобетонные блоки ФБС и их характеристики

Железобетонные блоки ФБС представляют собой монолитные, вытянутые по длине прямоугольные изделия из железобетона, снабженные монтажными зазорами и петлями. Производятся эти ЖБИ из бетона тяжелых сортов. В этих изделиях предусмотрены металлические монтажные петли.

Применяются бетонные блоки ФБС для возведения стен и фундаментов в малоэтажном строительстве. Их назначение связано с приемом и перераспределением нагрузки всего сооружения, поэтому прочности, надежности и долговечности этих ЖБИ уделяется особое внимание. Чаще всего ФБС используются при возведении ленточных фундаментов и стен подвальных и полуподвальных помещений.

Завод ЖБИ-4 предлагает более двух десятков модификаций блоков ФБС, различающихся своими габаритами. Наиболее ходовые позиции с высотой 58см, но есть блоки и с другими параметрами. Конкретная модификация выбирается в зависимости от особенностей строения, его этажности, расчетного веса всего сооружения и типа грунта.

Применение железобетонных блоков ФБС при возведении фундамента позволяет существенно экономить не в ущерб качеству и не задерживать процесс строительства. Фундаментные блоки быстро и легко укладываются. В результате фундамент получается не менее прочным и надежным, чем при создании монолитной конструкции с существенным преимуществом по цене и срокам выполнения работ.

Как купить блоки для фундамента и стен из железобетона?

Заказать фундаментные блоки можно как при непосредственном обращении на завод ЖБИ-4, так и посредством сайта или электронной почты. Для этого необходимо оформить заявку, согласовав предварительно по телефону или уточнив на сайте точное наименование интересующих позиций, их маркировку, габариты и цены.

Прайс на ЖБИ, размещенный на сайте, содержит всю необходимую информацию для оформления заказа. Далее заявку необходимо передать в офис компании посредством интернета или факса. После оплаты выставленного согласно заявке счета заказ комплектуется и готовится к отгрузке. Доставку на объект оплаченных ЖБИ нашим транспортом необходимо согласовать заранее, желательно при подтверждении оплаты заказа.

Размеры по ГОСТу- Таблица +Видео монтажа

Фундаментные блоки строительные, или проще ФБС, в наше время самые распространенный вид железобетонных изделий. Готовые блоки проще и дешевле закладывать в фундамент дома, чем заливать сплошным бетоном и ждать пока он застынет. Блок ФБС используют для строительства цокольных стен и подвалов. 

[contents]

Виды ФБС блоков для фундамента

Задача  ФБС блоков выдерживать огромные нагрузки, удерживая на себе вес всего здания. Выбирая фундаментные блоки, следует учитывать их способности к пожаростойкости, водонепроницаемости и морозостойкости.

Согласно с ГОСТ 13579-78 фундаментные блоки подразделяются на три вида – ФБС, ФБВ и ФБП. Изготавливают их из силикатного, керамзитобетона или из тяжелого бетона.

ФБС – полнотелые изделия из бетона, самые прочные в сравнении с другими видами. Именно этот тип применяют для постройки фундамента дома, подвалов или технических подполий. Изготавливают в виде параллелепипеда, металл используется только для специальных петель, предназначенных для монтажа блоков.

Блоки вида ФБВ наименее распространенные и их следует заранее заказывать у производителя. От блоков ФБС отличаются наличием продольного выреза предусмотренного под коммуникации.

Марка ФБП – пустотный фундаментный блок. У них одна стандартная длина 2,4 м, но по высоте и ширине могут отличаться. Облегченные блоки изготавливаются оставляя вертикально-замкнутые или горизонтальные пустоты.

Блоки ФБП не рекомендуют применять при влажном, вязком грунте.

По технологии блоки ФБС уплотняют с помощью вибрации, стандартные опоки должны обеспечивать одинаковые размеры всех изделий и гладкую поверхность. Если технология нарушена, невозможно будет ровно уложить все блоки, появятся щели, скосы, что значительно уменьшит качества фундамента к гидро- и теплоизоляции.

Кроме ГОСТовских, различают ещё несколько маркировок. Для справки, приведём краткий список конструкций элементов нулевого цикла:

  • Ф – это железобетонная или бетонная конструкция для из утяжелённого бетона, предназначенная для колонн, как правило, стаканного типа;
  • ФЛ – так же, железобетон из тяжёлого бетона, предназначается под устройство ленточного фундамента;
  • БФ – железобетонный ленточный элемент из тяжёлого бетона, используется при возведении внутренних и наружных стен здания для промышленных и сельхоз нужд;
  • ФР – железобетон из утяжелённого бетона для трёхшарнирных рам.

Попытаемся теперь разобраться, какой бетон чаще всего используется. Ленточные фундаменты – это, в первую очередь, строительные конструкции, которые работают преимущественно по сжатию (за исключением фундаментных подушек). Поэтому, необходимости применения высоких марок и классов бетона практически нет. Обратимся к ГОСТу 13579-78: максимальным классом прочности на сжатие будет В15 или же бетон с маркировкой М-200. Минимальным классом для керамзитбетонной продукции или тяжёлого бетона считаем В3,5 или маркировки М-50. И минимальным классом для изделий из силикатного бетона – В12,5 или марки М-150.

В большинстве случаев, для фундамента выбирается утяжелённый цементный бетон В7,5 для блоков видов ФБВ и ФБС. Для более слабых ФБП необходим куда более прочный материал типа В12,5.

Чтобы знать какой размер фундаментных блоков вам необходим для строительства, необходимо заранее начертить схему, чертеж, где будут подробно указаны расположения всех блоков.

Маркировка фундаментных блоков

Рассмотрим маркировку фундаментных блоков. Последующие цифры после первых букв означают длину, ширину и высоту блока. Учитывайте, что параметры обычно завышены на 20 мм.

Например, ФБС -24-3-6, длина – 2380мм, ширина – 300мм, высота – 580 (20 мм).

В зависимости от марки бетона вес блока может меняться.

Блоки из тяжелого бетона с армированием, называются фундаментными подушками, сокращенно ФЛ. Их используют при постройке ленточных фундаментов, для жилых высотных зданий. В связи с большой нагрузкой, выдерживаемой блоками ФЛ, при изготовлении к ним выдвигаются высокие требования точности размеров и качества материала. Железобетонные фундаментные блоки способны выдерживаться сейсмическую активность в 9 балов, имеют высокую устойчивость к температурным колебаниям и коррозии.

Размер фундаментных блоков ФЛ определяет ГОСТ 13580-85.

Таблица размеров ФБС блоков

Выбор фундаментных блоков для строительства

Вид фундаментных блоков выбирается в зависимости от следующих параметров:

Обычно на длину одной стены рассчитывают 4-5 блоков ФБС. Для влажных и глинистых грунтов выбирается крупногабаритные фундаментные блоки ФБС, а для сухих, где закладка выполняется на глубине 60-70 см, применяют средние ФБС.

Для строительства небольших домиков, дач, баней, коттеджей используют фундаментные блоки по размеру 40х20х20 мм. Их можно укладывать вручную, без использования спец техники. Благодаря удобным размерам фундаментный блок 20х20х40 используют не только при укладке фундамента, но и при возведении стен здания.


Фундаментные блоки ФБС — доступные цены

Цены на фундаментные блоки

Наименование изделия Размеры Цена, руб
Блок ФБС 24х4х6 238х40х58 1900
Блок ФБС 12х4х6 118х40х58 1100
Блок ФБС 9х4х6 88х40х58 900
Блок ФБС 24х3х6 238х30х58 1700
Блок ФБС 12х3х6 118х30х58 1000
Блок ФБС 9х3х6 88х30х58 900

Зачем использовать фундаментные блоки?

Купив фундаментные блоки в Калининграде, вы существенно облегчите строительство здания. Эти конструкции:

  • упрощают строительные работы. После подготовки основания их достаточно просто уложить на поверхность. Для работы понадобится только подъемная техника. Швы между блоками заполняются раствором. После того как последний затвердеет, на ФБС можно размещать другие элементы здания;
  • ускоряют строительство объекта. Бетон твердеет и набирает прочность минимум в течение месяца. Фундаментные блоки не нужно выдерживать, специальным образом обрабатывать или готовить к применению. Как результат, общая цена реализации проекта существенно уменьшается;
  • долговечны и надежны. Технология производства фундаментных блоков давно отлажена. ФБС, в отличие от бетона, не нуждается в тщательном контроле качества непосредственно на строительном объекте. Срок службы составляет не менее 40 лет;
  • доступны по цене. ФБС производятся из дешевых материалов. Цена строительства снижается, когда используются бывшие в употреблении блоки. Предыдущая эксплуатация почти не сказывается на характеристиках ФБС. При использовании блоков цена строительства в среднем ниже на 20%, чем при заливке монолитных конструкций.

ФБС: цена и разнообразие размеров блоков

Стандартизированы различные размеры ФБС, цена прямо пропорциональна этому параметру. Фундаментные блоки легко подобрать по площади и конструкции здания. Подгонять проект под ФБС не нужно. Дополнительные задачи помогают решить специальные фундаментные блоки, цена на такие ФБС компенсируется экономией на других материалах.

 

Пустотные фундаментные блоки обеспечивают отличную теплоизоляцию. Во многих случаях утеплять конструкции из подобных ФБС не нужно. Блоки с выемками хорошо герметизируют швы.

Ширина варьируется в пределах 30-60 см с интервалом в 10 см. Высота ФБС составляет 58 или 28 см. Наибольшим спросом пользуются блоки с длиной 2,38 и 1,18 м.

Купить блоки ФБС в Калининграде в ГК «Славяне»

Купить блоки ФБС в Калининграде можно в ГК «Славяне». Фундаментные блоки производятся на наших собственных предприятиях. При изготовлении ФБС соблюдаются все действующие нормативы. Мы гарантируем выгодные цены на нашу продукцию.

Блоки сплошные и с выемками соответствуют классу прочности на сжатие В7,5, пустотные ФБС — В12,5. Все блоки усилены арматурой. Если вы затрудняетесь с выбором ФБС, наши специалисты помогут подобрать оптимальную форму и размеры.

Фундаментные блоки

Блоки фундаментные железобетонные – это конструкции, которые используются в качестве сборных фундаментов при строительстве различных объектов. Высокопрочные фундаментные блоки применяются, как правило, при возведении малоэтажных зданий и сооружений. Также с помощью фундаментных блоков строятся подземные помещения различной глубины, где блоки выступают в качестве стенок (подвальные и цокольные помещения, технические подполья зданий и др.). Поэтому часто их можно встретить под другим названием – блоки стен подвалов.

Жб фундаментные блоки широко применяются для возведения столбчатого или ленточного фундамента – они укладываются по периметру и осевым линиям предполагаемой постройки. Стык между блоками заполняется специальным раствором, обеспечивающим прочность соединения блоков и защиту от повреждений, вызываемых окружающей средой (влажность, смена температуры воздуха, климатические осадки и т.д.).

Основное направление, где фундаменты нашли применение, – это промышленное строительство. Однако небольшой вес и универсальность блоков позволяет использовать их и в частном строительстве – без необходимости привлечения тяжелой техники можно в кратчайшие сроки устроить фундамент любой площади и конфигурации. Фундаментные блоки используются также в дорожном строительстве, где они выполняют функцию постоянных или временных барьерных преград на проезжей части автомобильных дорог и в местах, которые не предназначаются для заезда транспорта.

Железобетон способен легко и максимально долго переносить различные нагрузки, которые воздействуют на сооружение. Помимо этого железобетон обладает высоким порогом водонепроницаемости: поверхность бетона не разрушается под действием влаги и активных химических соединений, в избытке содержащихся во влажной среде. Поэтому его применение в качестве материала для изготовления подземных фундаментов вполне обосновано: фундамент из сборных бетонных блоков полностью выполняет свою функцию — восприятие нагрузок от веса здания на его основание и последующее распределение этих нагрузок в грунт.

Фундаменты для возведения зданий и сооружений бывают монолитными и сборными. Монолитные фундаменты из железобетона изготавливаются непосредственно на месте строительства – бетон заливается в вырытый котлован. Сборные фундаментные блоки изготавливаются предварительно на заводе и только после набора бетоном необходимой прочности отправляются на стройплощадку. При схожих характеристиках сборные фундаментные блоки обладают весомым преимуществом по сравнению с монолитными фундаментами: стоимость отдельных блоков и их монтаж обходятся значительно дешевле и быстрее, позволяя сэкономить не только ценные средства, но и бесценное время, которое затрачивается на строительство сооружения.

Железобетонные фундаментные блоки делятся на несколько типов:

  • блоки ФБ, блоки ФБС – сплошные блоки стенного типа;
  • блоки ФБВ – сплошные блоки с вырезом для укладки перемычек и прокладки инженерных коммуникаций под потолками подвалов и технических подпольев;
  • блоки ФБП – пустотные блоки с открытыми вниз пустотами для заполнения их дополнительным утеплителем или для омоноличивания связываемых сборных элементов.

Железобетонный фундаментный блок представляет собой прямоугольный параллелепипед, боковые грани которого имеют специальные пазы. При монтаже пазы заливаются гидроизолирующим раствором. Верхняя плоскость фундаментного блока имеет монтажные петли, которые служат для удобства монтажа.

Монтаж фундаментных блоков, как и любых других фундаментов, начинается с подготовки основания. Основание выполняется из выровненного слоя песка, называемого подушкой. Длина и ширина основания должны быть на 200-300 мм больше, чем длина и ширина блоков. Это нужно для того, чтобы в дальнейшем не возникали отвисания блоков с песчаной подушки. Если строительство фундамента предполагает наличие подвала и ведется на сухих и непучинистых грунтах, то фундаментные блоки допускается устанавливать непосредственно на само основание грунта, предварительно выравненное песком. Для того, чтобы увеличить несущую способность фундамента, фундаментные блоки устанавливают на фундаментные подушки ФЛ, которые служат для увеличения площади опоры.

Монтаж фундаментных блоков начинается с блоков, которые расположены по углам фундамента, на перемычках и фундаментных пересечениях, они выполняют функцию маячков. Затем фундаментные блоки ЖБИ укладываются по схеме их раскладки в соответствии с проектом и с учетом разрывов для прокладки труб водоснабжения, канализации и других коммуникаций. Стыки блоков в обязательном порядке заполняются специальным гидроизолирующим раствором, толщина которого зависит от размера блоков.

Фундаментные блоки изготавливаются в соответствии с ГОСТ 13579-78 «Блоки бетонные для стен подвалов» из тяжелого, легкого или плотного силикатного бетона. Класс бетона по прочности на сжатие принимается от В3,5 до В15 – для блоков из легкого и тяжелого бетонов, В12,5 – для блоков из плотного силикатного бетона. Классы бетона по морозостойкости и водонепроницаемости назначаются в зависимости от проекта и климатических условий в районе строительства.

Фундаментные блоки, как правило, не армируются. В некоторых случаях блоки имеют арматурные выпуски, например, для установки ленточного фундамента: блоки жестко связываются между собой и объединяются в единую рамную конструкцию. Монтажные петли блоков изготавливаются из стержневой горячекатаной арматуры гладкой класса А-I марок ВСт3пс2 и ВСт3сп2 или периодического профиля Аc-II, марки 10ГТ. Арматуру из стали марки ВСт3пс2 не допускается применять для монтажных петель, предназначенных для подъема и монтажа блоков при температуре ниже -40°С.

Фундаментные блоки маркируются буквенно-цифровым обозначением, в котором указывается тип блока (ФБ, ФБС – сплошные; ФБВ – сплошные с вырезом для укладки перемычек и пропуска коммуникаций под потолками подвалов и технических подпольев; ФБП – пустотные (с открытыми вниз пустотами)) и его габаритные размеры в дециметрах – длина, ширина и высота, округленные до целых чисел. Далее через дефис указывается вид бетона, где Т – тяжелый, Л – легкий, С – плотный силикатный.

В компании ГК «БЛОК» можно не только заказать блоки фундаментные железобетонные, но и проконсультироваться с нашими специалистами, подобрать требуемые конструкции железобетонных изделий. В нашем отделе продаж можно заранее узнать и уточнить цену железобетонных фундаментных блоков и рассчитать общую стоимость заказа. Купить железобетонные фундаментные блоки и проконсультироваться по общим вопросам покупки и доставки Вы можете, позвонив по телефонам компании ГК «БЛОК»: Санкт-Петербург: (812) 309-22-09, Москва: (495) 646-38-32, Краснодар: (861) 279-36-00. Режим работы компании: Пн-Пт с 9-00 до 18-00. Компания ГК «БЛОК» осуществляет доставку железобетонных фундаментных блоков по всей России прямо до объекта заказчика или на строительную площадку, если позволяет инфраструктура.

По вопросам монтажа железобетонных фундаментных блоков обращаться по телефону (812) 309-22-09.

NCAA College Football FBS текущая индивидуальная статистика

ФБС

Футбол

FBSFCSDIIDIII

ИНДИВИДУАЛЬНАЯ СТАТИСТИКА

Выберите индивидуального StatisticAll PurposeBlocked KicksCombined удара ReturnsCompletion PercentageCompletions Per GameField Гол PercentageField голов за GameForced FumblesFumbles RecoveredInterceptions Per GameKickoff Вернуться TDsKickoff ReturnsPasses DefendedPassing EfficiencyPassing TDsPassing YardsPassing Yards Per GamePassing Yards за CompletionPoints ответственного ForPoints несет ответственность за Per GamePunt Вернуться TDsPunt ReturnsPuntingReceiving TDsReceiving YardsReceiving Yards Per GameReceptions Per GameRush Yards За выполнение Рашинг ТДСтроительные ярдыСкорые ярды за игруМешки Подсчет очковСоло отборыОбщие отборы на поражениеОбщее количество перехватовОбщее нападениеОбщее количество набранных очковОбщее отборовОбщее количество приземлений Ярдов за попытку паса Восприятие ярдов

СТАТИСТИКА КОМАНДЫ

Выбор команды Statistic3rd вниз Преобразование Pct3rd вниз Преобразование Pct Defense4th вниз Преобразование Pct4th вниз Преобразование Pct DefenseBlocked KicksBlocked Kicks AllowedBlocked PuntsBlocked плоскодонки AllowedCompletion PercentageDefensive TDsFewest PenaltiesFewest Штрафные санкции в GameFewest Штраф YardsFewest Штраф Yards Per GameFirst Downs DefenseFirst Downs OffenseFumbles LostFumbles RecoveredKickoff Возвращение DefenseKickoff ReturnsNet PuntingPasses Если бы InterceptedPasses InterceptedPassing OffensePassing Разрешенные ярдыПроходные ярды за завершениеПроходная защитаПроходная защитаПроходная оборонаЗащита красной зоныНападение в красной зонеСпешная защитаСпешное нападениеРазрешенные мешкиВозможность подсчета очков в защитеСчетное нападениеУсловия для проигрыша РазрешеныКомандные передачи ЭффективностьКомандные передачи Эффективность защитыКомандные мешкиКомандные захваты на проигрышВремя владенияБоевое преимущество7Общее количество оборотов

Punting

Последнее обновление 12 января 2021 г. Через игры 11 января 2021 г.

10 крупнейших футбольных стадионов в стране | Bleacher Report

0 из 10

    Tony Ding / Associated Press

    Каждую осень фанаты студенческого футбола стекаются на огромные стадионы и собирают их, чтобы поддержать их любимую программу.

    В некоторых местах по всей стране более 100 000 болельщиков могут собраться на одном стадионе на одну игру. Если вы расширите некоторые возможности, посещаемость может приблизиться к 110 000.

    Неудивительно, что крупнейшие стадионы в Соединенных Штатах в основном расположены в Большой десятке и ТРЦ, где традиции проходят 365 дней в году.

    Гигантские сооружения не только самые большие в студенческом футболе, но и значительно превосходят стадионы во всех других видах американского спорта.

    Каждое заведение имеет свои характерные черты и исторические моменты, которые делают его уникальным.

    Мы смотрели на них, считая 10 крупнейших стадионов студенческого футбола.

1 из 10

    Daniel Shirey / Getty Images

    Вместимость : 92,746

    Характеристики подписи

    Поле на территории кампуса Университета Джорджии окружено живой изгородью. В отличие от большинства стадионов по всей стране, поле ориентировано с востока на запад, а не с севера на юг.

    Лучшие моменты

    Единственный случай, когда фанатам удалось штурмовать поле на стадионе Сэнфорд, произошел после победы над Теннесси в 2000 году, когда «Бульдоги» впервые за 12 лет победили волонтеров.

    Помимо футбола, на стадионе «Сэнфорд» проходили футбольные матчи на летних Олимпийских играх 1996 года — мероприятие, в результате которого были удалены изгороди торговой марки, чтобы они соответствовали размерам поля. Позже кустарник был заменен новой живой изгородью, выросшей из обрезков старых изгородей.

2 из 10

    Mark J. Terrill / Associated Press

    Вместимость: 93,607

    Особенности подписи

    Колизей не только является домом для футбола USC, но и принимает у себя Лос-Анджелес. Анхелес Рэмс из НФЛ на данный момент.

    Помимо футбола, Колизей дважды принимал Олимпийские игры и снова будет в центре внимания в 2028 году, когда Летние игры вернутся в Лос-Анджелес.

    Котел наверху стадиона содержит олимпийский огонь и зажигается во время футбольных игр.

    После переезда в Лос-Анджелес из Бруклина в Лос-Анджелес Доджерс из MLB с 1958 по 1961 год называли Колизей своим домом, ожидая открытия стадиона Доджер. Чтобы отметить 50-ю годовщину той первой игры, Доджерс принимали тогдашнего чемпиона мира Бостон Ред Сокс на предсезонную выставочную игру в марте 2008 года — последний раз, когда бейсбол проводился в этом месте.

    Лучшие моменты

    Первый Суперкубок состоялся в Колизее в 1967 году, а в 1973 году шатровое мероприятие вернулось к еще одному раунду Суперкубка VII.Один из самых ярких моментов в истории Университета Южной Калифорнии произошел на стадионе на 93 607 мест в 1974 году, когда троянцы вернулись с 24 очками вниз и разгромили Нотр-Дам, 55–24, в игре под названием «Возвращение».

3 из 10

    Майкл Томас / Ассошиэйтед Пресс

    Вместимость : 100119

    Особенности подписи

    Мемориальный стадион Даррелла К. Роял-Техас назван в честь легендарного тренера Техаса, но до того, как он стал скучным свое нынешнее название, он был посвящен Техасскому мемориальному стадиону в 1924 году в честь 198 520 техасцев, сражавшихся в Первой мировой войне.Освещение было добавлено только через 31 год после открытия стадиона, чтобы можно было проводить ночные игры.

    Лучшие моменты

    В последние годы в Остине, штат Техас, не было тонны поводов для радости, но Лонгхорны обыграли 10-ю Нотр-Дам 4 сентября 2016 года в двойном овертайме впереди. 102 315 болельщиков — самая большая толпа в истории стадиона.

    В 1998 году Рики Уильямс побил рекорд скорости 22-летнего Тони Дорсетта в Дивизионе I-A — 6082 ярда в победе над своим соперником Texas A&M в Остине.

4 из 10

    Butch Dill / Associated Press

    Вместимость : 101821

    Особенности подписи

    На протяжении большей части своего существования стадион Брайант-Денни не имел логотипов на поле. На рубеже веков графика конечных зон и полузащитников была нарисована на траве в Таскалузе, штат Алабама, для придания более современного вида.

    В честь легендарного тренера Пола «Медведя» Брайанта узор «гусиные лапки» из знаменитой шляпы, которую он носил, гуляя по боковой линии, можно найти в разных местах по всему стадиону.Фактически, в 2008 году была построена гигантская копия шляпы, которая разместилась на концессионном стенде, известном как «Медвежье логово».

    Лучшие моменты

    Эпоха Ника Сабана принесла множество памятных моментов в Брайант-Денни, в том числе положила конец шестилетней серии в Iron Bowl Оберна с решительной победой со счетом 36: 0 в 2008 году и Блок с игры Терренса Коди, чтобы обыграть Теннесси в 2009 году.

    Время, проведенное бывшим главным тренером Майка Шулы в Таскалузе, даже принесло немало невероятных результатов, например, прием Тирона Протро приземлением на 87 ярдов от Броди Кройла, открывший игру при расстроенном счете 31: 3. Флорида в 2005 году.

5 из 10

    Chris Graythen / Getty Images

    Вместимость : 102 321

    Функции подписи

    LSU — одна из немногих программ в стране, которая играет на поле с маркерами линий каждые пять ярдов вместо традиционных 10. На стадионе «Тигр» также есть старомодные стойки ворот.

    LSU, наряду со штатами Флорида и Вашингтон, входит в список школ, в которых используются стойки ворот в H-образном стиле, а не в стандартном Y-образном стиле.»

    Лучшие моменты

    Некоторые легендарные моменты на стадионе» Тайгер «произошли против Оле Мисс. В 1959 году 89-ярдовым возвратом Билли Кэннона в тачдаун и поздней стойкой у ворот удалось добиться лучших результатов. оценил Tigers победой над повстанцами.

    Спорный сбой часов в 1972 году позволил Берту Джонсу найти Брэда Дэвиса для выигрышного паса на последних секундах игры против повстанцев.

    Затем, в 1988 году, после того, как Эдди Фуллер поймал приземление проходя от Томми Ходсона, чтобы опередить ЛГУ над Оберном, оставалось меньше двух минут, оглушительный шум толпы зарегистрировал на сейсмографе геологического факультета ЛГУ в нескольких кварталах от него.Это стало известно как «Игра землетрясений».

6 из 10

    Wade Payne / Associated Press

    Вместимость: 102 455

    Элементы подписи

    Оранжевые и белые концевые зоны шахматной доски выделяются первыми, когда вы смотрите на гусака на стадионе Neyland в Теннесси. Когда он впервые открылся в 1921 году, он вмещал до 3200 зрителей. С тех пор было около 20 расширений и / или частичных обновлений для добавления сидячих мест.

    Лучшие моменты

    Два ключевых момента произошли в Ноксвилле, штат Теннесси, на пути к национальному чемпионату Волса в 1998 году. Пропущенный мяч с игры в овертайме кикером из Флориды Коллинз Купер принес Филиппу Фулмеру его первую победу над аллигаторами.

    Позже в этом сезоне «Споткнуться и шарить» защитника Арканзаса Клинта Штёрнера позволил Волам победить 10-го Рейзорбэка на позднем приземлении Трэвиса Генри.

    В 2004 году кикер «Волса» Джеймс Уилхойт забил 50 ярдов с игры с шестью секундами до финиша всего за несколько минут после того, как пропустил решающее дополнительное очко, потеряв соперника из Флориды.

7 из 10

    Sam Craft / Associated Press

    Вместимость : 102,733

    Особенности подписи

    Дом Texas A&M является самым большим стадионом в SEC, а внутри вы найдете один из самые уникальные фан-базы в спорте, 12-й человек.

    На одной стороне стадиона четыре палубы, на одном из уровней расположен Зональный клуб, который защищен выступом четвертой палубы и имеет бар с полным спектром услуг и концессионную стойку.Роскошная зона отдыха считается одним из лучших мест для наблюдения за игрой в Колледж-Стейшн, штат Техас.

    Лучшие моменты

    Два самых запоминающихся момента в Кайл Филд были связаны с трагедиями: обрушение костра в 1999 году, в результате которого погибли 11 нынешних и один бывший студент перед игрой в Техасе, когда Агги расстроили занявших седьмое место Лонгхорнов (20-16 лет) своей эмоциональной победой; и победа над штатом Оклахома в первом домашнем матче после 11 сентября, когда фанаты Эджи, вдохновленные массовым движением, украсили стадион красным, белым и синим цветами в память о погибших в атаках.

    Хотя Эджи не обыграли Оклахому в 2000 году, 27-ярдовый приземление Джа’Мара Тумбса с несколькими защитниками Сунерса в конечную зону — еще один неподвластный времени момент для Кайл Филд.

8 из 10

    Джей ЛаПрет / Associated Press

    Вместимость : 104 944

    Особенности подписи

    Первое, что вы замечаете в стадионе Огайо, — это его форма. Автомобиль вместимостью 104 000 с лишним мест выполнен в виде подковы. Стадион также расположен в пойме реки Олентанги.Чтобы предотвратить возможные наводнения, была построена стена из гидросмеси, когда стадион прошел последнюю реконструкцию, завершившуюся в 2001 году.

    Лучшие моменты

    «Игра века» между штатом Огайо № 1 и № 2 Мичиган проходил в 2006 году на стадионе Огайо.

    Штат Огайо оторвался во втором тайме на 56-ярдовом приземлении Антонио Питтмана и навсегда вышел вперед с 13-ярдовым приземлением Брайана Робиски от Троя Смита в упорной победе со счетом 42: 39.

    Баккейз выиграли восемь матчей подряд у себя дома против Мичигана, включая победу в двойном овертайме 2016 года со счетом 30–27.

9 из 10

    Brett Carlsen / Getty Images

    Вместимость : 106 572

    Особенности подписи

    Стадион Penn State подвергся реконструкции, чтобы увеличить количество посадочных мест в семь раз за последние четыре десятилетия, с завершением последней модернизации в 2011 году.

    Шесть раз он увеличивал свою вместимость до 110 000 человек, достигнув максимума в 110 753 человек, когда отель Nittany Lions принимал Небраску в 2002 году.

    До 1959 года первоначальный Бивер-Филд вмещал всего 30 000 человек, а затем был разобран на 700 частей и перевезен через кампус на его нынешнее место, где он был перестроен с дополнительными 16 000 мест.

    Лучшие моменты

    Одна из самых больших побед штата Пенсильвания была одержана в 1982 году, когда защитник Тодд Блэкледж спроектировал камбэк, в результате которого «Ниттани Лайонс» обогнали № 2 Небраски на пути к национальному чемпионату.В 2016 году Пенн Стэйт одержал одну из своих самых больших побед со времен саги о Джо Патерно, когда Грант Хейли вернул заблокированный мяч с игры на 60 ярдов для тачдауна и нокаутировал Огайо Стэйт, 24-21.

    «Ниттани Лайонс», возможно, не обыграли Майами 1 сентября 2001 года, но это дата, которую все запомнят, поскольку Адам Талиаферро шел через туннель менее чем через год после того, как защитник получил травму спинного мозга в матче со штатом Огайо, что, как некоторые думали, могло бы произойти. оставить его парализованным.

10 из 10

    Tony Ding / Associated Press

    Вместимость : 109 901

    Характеристики подписи

    Они не зря называют это «Большим домом».Росомахи входят на самый большой стадион студенческого футбола, прикоснувшись к надписи «Go Blue», которая ждет их на выходе из раздевалки.

    Стадион «Мичиган» принимал международные товарищеские матчи по футболу и хоккейные матчи, и он меньше стадиона «1 мая» в Пхеньяне, Северная Корея.

    Лучшие моменты

    Возвращение Десмонда Ховарда и Чарльза Вудсона против штата Огайо в 1991 и 1997 годах, соответственно, укрепило их победы на Хейсман Трофи.

    Мичиган также завершил сезон мечты №1 в штате Огайо в 1969 году, в первый год того, что было названо «Десятилетней войной» между главными тренерами Бо Шембехлером и Вуди Хейсом.

    Росомахи также страдали от горя на своей родной территории на протяжении многих лет, в том числе «Радуйся Мэри» Корделла Стюарта в Колорадо в 1994 году, оставившего верующих из Мичигана ошеломленными после поражения 27-26.

Far-UVC light: новый инструмент для контроля распространения микробных заболеваний, передаваемых по воздуху

Far-UVC лампы

Мы использовали группу из трех эксимерных ламп, содержащих смесь газов Kr-Cl, которая преимущественно излучает на длине волны 222 нм. 25,26 .Выходное окно каждой лампы было закрыто специальным полосовым фильтром, предназначенным для удаления всего излучения, кроме доминирующей длины волны, как описано ранее 15 . Каждый полосовой фильтр (Omega Optical, Brattleboro, VT) имел центральную длину волны 222 нм и полную ширину на полувысоте (FWHM) 25 нм и обеспечивает пропускание> 20% на 222 нм. УФ-спектрометр (SPM-002-BT64, Photon Control, BC, Canada) с диапазоном чувствительности от 190 нм до 400 нм использовался для проверки спектра излучения 222 нм.Для радиометрической калибровки УФ-спектрометра использовали эталон дейтериевой лампы со спектральной энергетической освещенностью, отслеживаемой NIST (Newport Model 63945, Irvine, CA). С помощью монитора озона SM-70 (Aeroqual, Avondale, Окленд, Новая Зеландия) было измерено, что образование озона от ламп составляет <0,005 ppm, что не является значительным уровнем для обеспечения противомикробного эффекта для вирусов в аэрозольной форме 27 .

Дозиметрия Far-UVC

Измерения оптической мощности проводились с использованием кремниевого фотоприемника малой мощности 818-UV / DB с УФ-усилением и измерителя оптической мощности 843-R (Ньюпорт, Ирвин, Калифорния).Дополнительная дозиметрия для определения однородности УФ-облучения проводилась с использованием пленки, чувствительной к дальнему УФ-С, как описано в нашей предыдущей работе 28,29 . Эта пленка имеет высокое пространственное разрешение с возможностью разрешения деталей до 25 мкм и демонстрирует почти идеальный косинусоидальный отклик 30,31 . Измерения проводились между экспериментами, что позволило разместить датчики внутри камеры.

Диапазон воздействия ультрафиолетового излучения вдали от 3,6 мкДж / см 2 до 281.6 мДж / см 2 , были использованы для определения калибровочной кривой отклика. Пленки сканировали как 48-битные изображения RGB TIFF с разрешением 150 dpi с помощью планшетного сканера Epson Perfection V700 Photo (Epson, Япония) и анализировали с помощью программного обеспечения для анализа радиохромных пленок 32 для расчета общей экспозиции на основе измеренных изменений оптической плотности.

Измерения с использованием кремниевого детектора и УФ-чувствительных пленок были объединены для расчета общей дозы, полученной частицей, пересекающей окно экспонирования.Три вертикально установленных друг на друга лампы обеспечивали почти равномерное распределение дозы по вертикальной оси, таким образом, каждая частица, проходящая горизонтально через камеру облучения, получала одинаковую дозу. Ширина лампы (100 мм) была меньше ширины окна камеры облучения (260 мм), поэтому мощность лампы была выше вблизи центра окна камеры облучения по сравнению с краем. Чувствительная к УФ-излучению пленка показала мощность приблизительно 120 мкВт / см 2 в центральной трети окна и 70 мкВт / см 2 для внешней трети.Кремниевый детектор использовали для количественной оценки отражательной способности алюминиевого листа примерно при 15% падающей мощности. Объединение этих данных позволило рассчитать среднюю общую дозу 2,0 мДж / см 2 на частицу, пересекающую окно за 20 секунд. Кроме того, кремниевый детектор использовался для подтверждения того, что ослабление света с длиной волны 222 нм через один лист пластиковой пленки составляло 65%. Добавление одного или двух листов полиэтиленовой пленки между лампами и окном камеры облучения дало среднюю дозу 1.3 мДж / см 2 и 0,8 мДж / см 2 соответственно.

Настольная камера для аэрозольного облучения

Однопроходная динамическая камера для аэрозольного / вирусного облучения была сконструирована в конфигурации, аналогичной той, что использовалась Ко и др. . 33 , Лай и др. . 34 , и Макдевитт и др. . 19,35 . Схематический обзор системы показан на рис. 3 и изображен на рис. 4. Аэрозольные вирусы были созданы путем добавления раствора вируса в высокопроизводительный распылитель расширенной аэрозольной респираторной терапии (HEART) (Westmed, Tucson, AZ) и работает с двухголовым насосом (Thermo Fisher 420–2901–00FK, Waltham, MA) с расходом на входе 11 л / мин.Вирус в аэрозольной форме поступал в камеру облучения, где он смешивался с независимо контролируемыми входами увлажненного и осушенного воздуха. Увлажненный воздух создавался барботированием воздуха через воду, а сухой воздух — пропусканием воздуха через осушитель осушающего воздуха (X06–02–00, Wilkerson Corp, Richland, MI). Регулировка соотношения влажного и сухого воздуха позволяла контролировать относительную влажность (RH) в камере облучения, которая, наряду с настройками распылителя, определяла гранулометрический состав аэрозольных частиц.Оптимальное значение относительной влажности 55% привело к распределению размеров аэрозольных частиц, аналогичному естественному распределению при кашле и дыхании человека, которое, как было показано, распределяется примерно в 1 мкм, со значительной долей частиц менее 1 мкм 36 , 37,38 .

Рисунок 3

Схематическая диаграмма пользовательской камеры УФ-облучения. Камера изображена сверху вниз. Компоненты установки включают: барботер воды для подачи увлажненного воздуха (A), эксикатор для подачи сухого воздуха (B), распылитель (C), перегородки (D), измеритель относительной влажности и температуры (E), измеритель размера частиц ( F), лампы дальнего УФС (G), полосовые фильтры (Н), пластиковое окно, пропускающее дальний УФС (I), отражающая алюминиевая поверхность (J) и биосэмплер (K).Насосы используются для создания давления в небулайзере для образования аэрозоля и для управления потоком через систему. Клапаны управления потоком позволяют регулировать систему. HEPA-фильтры включены во все входы и выходы воздуха. Набор трехходовых клапанов контролирует поток к биосэмплеру или вокруг него. Лампы, расположенные вертикально друг за другом, направлены к окну в боковой части камеры, чтобы обнажить аэрозоли, проходящие горизонтально. Дополнительные пленки для равномерного уменьшения дозы помещали между фильтрами и окном.Путь распространения вируса в аэрозольной форме внутри системы во время отбора проб обозначен красной пунктирной линией.

Рисунок 4

Фотография пользовательской камеры УФ-облучения. Экспериментальная установка показывает многие из необходимых компонентов, в то время как некоторые элементы, такие как насосы, фильтры и лампы, были опущены, чтобы лучше отобразить общую установку.

После объединения входных данных для контроля влажности с вирусом в аэрозольной форме, входной поток был направлен через серию перегородок, которые способствовали сушке и перемешиванию капель для обеспечения равномерного распределения частиц и стабильной влажности 34 .Относительная влажность и температура внутри камеры облучения контролировались с помощью измерителя Omega Rh42 (Omega Engineering Inc., Стэмфорд, Коннектикут) сразу после перегородок. К камере для облучения был присоединен измеритель размера частиц Hal Technologies HAL-HPC300 (Фонтана, Калифорния), чтобы обеспечить возможность отбора проб размеров частиц на протяжении всей операции.

При УФ-облучении лампы с длиной волны 222 нм располагались на расстоянии 11 см от окна камеры облучения. Лампы направлялись на окно камеры размером 26 см × 25,6 см, которое было изготовлено из прозрачной пластиковой пленки толщиной 254 мкм (Topas 8007×10, Topas Advanced Polymers, Florence, KY) и имело пропускание ~ 65% при 222 нм. .Стенка камеры облучения напротив прозрачного окна была изготовлена ​​из полированного алюминия, чтобы отражать часть ультрафиолетового света обратно через область экспонирования, таким образом увеличивая общую дозу облучения за счет прохождения фотонов в обоих направлениях. Глубина камеры облучения между окном и алюминиевой панелью составляла 6,3 см, создавая общий объем экспонирования 4,2 л.

Поток аэрозолей продолжает выходить из камеры облучения к набору трехходовых клапанов, которые могут быть сконфигурированы для либо проходят через обходной канал (используется, когда отбор проб не требовался), либо через BioSampler (SKC Inc, Eighty Four, PA), используемый для сбора вируса.BioSampler использует звуковой поток, воздействующий на поверхность жидкости, для сбора аэрозолей при работе с потоком воздуха 12,5 л / мин. Наконец, поток продолжал выходить из системы через конечный фильтр HEPA и в вакуумный насос (WP6111560, EMD Millipore, Billerica, MA). Вакуумный насос в конце системы питал поток через камеру облучения. Скорость потока через систему регулируется BioSampler. Учитывая скорость потока и общий экспозиционный объем камеры облучения, равный 4,2 л, единственная капля аэрозоля прошла через экспозиционный объем приблизительно за 20 секунд.

Вся камера облучения была установлена ​​внутри сертифицированного шкафа биобезопасности класса II типа A2 (Labconco, Канзас-Сити, Миссури). Все входы и выходы воздуха были оснащены фильтрами HEPA (GE Healthcare Bio-Sciences, Питтсбург, Пенсильвания) для предотвращения попадания нежелательного загрязнения в камеру, а также для предотвращения попадания любого вируса в окружающую среду.

Характеристики камеры облучения

Специальная камера облучения имитировала передачу вирусов в аэрозольной форме, образующихся при кашле и дыхании человека.Камера работала при относительной влажности 55%, что приводило к гранулометрическому составу 87% между 0,3 мкм и 0,5 мкм, 11% между 0,5 мкм и 0,7 мкм и 2%> 0,7 мкм. Сравнение с опубликованными диапазонами распределения частиц по размеру показано в таблице 1. Вирусы в аэрозольной форме эффективно передавались через систему, что подтверждается контролем (нулевое воздействие), показывающим четкую интеграцию вируса (рис. 1

Таблица 1 Пример распределения частиц по размеру от человека во время различных мероприятий приведены вместе с измеренными значениями для этой работы.

, вверху слева).

Протокол эксперимента

Раствор вируса в небулайзере состоял из 1 мл среды Игла, модифицированной Дульбекко (DMEM, Life Technologies, Гранд-Айленд, Нью-Йорк), содержащей 10 8 фокусообразующих единиц на мл (FFU / мл) вируса гриппа А. вируса [A / PR / 8/34 (h2N1)], 20 мл деионизированной воды и 0,05 мл сбалансированного солевого раствора Хэнкса с кальцием и магнием (HBSS ++ ). Камера облучения работала с аэрозольными вирусными частицами, протекающими через камеру и обходной канал в течение 15 минут до отбора проб, чтобы установить желаемое значение относительной влажности ~ 55%.Сбор пробы инициируется изменением потока воздуха из байпасного канала в биосэмплер с использованием набора трехходовых клапанов. Первоначально BioSampler был заполнен 20 мл HBSS ++ для улавливания аэрозоля. В течение каждого периода отбора проб, который длился 30 минут, внутренняя часть камеры облучения подвергалась воздействию ультрафиолетового света с длиной волны 222 нм через полупрозрачное пластиковое окно ультрафиолетового излучения. Изменение дозы дальнего УФ-излучения, доставляемой аэрозольным частицам, достигалось путем вставки дополнительных полупрозрачных пластиковых пленок УФ-излучения, идентичных материалу, используемому в качестве окна камеры, между лампами и окном камеры.Дополнительные пластиковые пленки равномерно снижали мощность, поступающую в камеру. Три тестовые дозы 0,8, 1,3 и 2,0 мДж / см 2 были достигнуты путем добавления двух, одной или отсутствия дополнительных пластиковых пленок соответственно. Контрольные исследования с нулевой дозой проводились при выключенных эксимерных лампах. Эксперименты с каждой дозой повторяли трижды. Вновь стерилизованный BioSampler использовался для каждого экспериментального цикла, чтобы предотвратить нежелательное загрязнение. Отрицательные контроли, в которых вирус был исключен из смеси для небулайзера, запускались с перерывами и не показали сбора вируса в BioSampler.После завершения периода отбора проб раствор из BioSampler был использован для анализа инфекционности вируса.

Анализ инфекционности вируса

Мы измерили вирусную инфекционность с помощью анализа формирования фокуса, в котором используются стандартные методы флуоресцентного иммуноокрашивания для обнаружения инфицированных клеток-хозяев и инфекционных вирусных частиц 39 . Вкратце, после прохождения через камеру для облучения в течение 30 минут 0,5 мл суспензии вируса, собранной из BioSampler, были наложены на монослой эпителиальных клеток Madin-Darby Canine Kidney (MDCK), обычно выращиваемых в DMEM с добавлением 10% фетальной бычьей сыворотки (FBS). ), 2 мМ L-аланил-L-глутамина, 100 Ед / мл пенициллина и 100 мкг / мл стрептомицина (Sigma-Aldrich Corp.Сент-Луис, Миссури, США). Клетки инкубировали с вирусом в течение 45 минут, трижды промывали HBSS ++ и инкубировали в течение ночи в DMEM. Затем инфицированные клетки фиксировали в 100% ледяном метаноле при 4 ° C в течение 5 минут и метили антителом к ​​нуклеопротеину вируса гриппа A [C43] (Abcam ab128193, Кембридж, Массачусетс) 1: 200 в HBSS ++ , содержащем 1% бычий сывороточный альбумин (BSA; Sigma-Aldrich Corp. St. Louis, MO, USA) при комнатной температуре в течение 30 минут при легком встряхивании. Клетки трижды промывали HBSS ++ и метили козьим антимышиным Alexa Fluor-488 (Life Technologies, Grand Island, NY) 1: 800 в HBSS ++ , содержащем 1% BSA, при комнатной температуре в течение 30 минут. при легком встряхивании.После трех промывок в HBSS ++ клетки окрашивали Vectashield, содержащим DAPI (4 ‘, 6-диамидино-2-фенилиндол) (Victor Laboratories, Burlingame, CA), и наблюдали с 10-кратным и 40-кратным увеличением Люминесцентный микроскоп Olympus IX70, оснащенный высокоэффективной цифровой камерой Photometrics PVCAM с высоким разрешением. Для каждого образца было получено не менее трех полей обзора объединенных изображений DAPI и Alexa-488. Программное обеспечение Image-Pro Plus 6.0 (Media Cybernetics, Bethesda, MD) использовалось для анализа 10-кратных изображений для измерения FFU UV как отношения клеток, инфицированных вирусом, к общему количеству клеток.

Анализ данных

Выжившую фракцию ( S ) вируса рассчитывали путем деления фракции клеток, дававших положительный рост вируса при каждой дозе УФ-излучения (FFU UV ), на фракцию при нулевой дозе (контроли FFU ). ): S = FFU UV / FFU контролирует . Значения выживаемости были рассчитаны для каждого повторного эксперимента и преобразованы в натуральный логарифм (ln), чтобы приблизить распределение ошибок к нормальному 40 . Линейная регрессия была выполнена с использованием этих нормализованных значений ln [ S ] в качестве зависимой переменной и дозы УФ-излучения (D, мДж / см 2 ) в качестве независимой переменной.Используя этот подход, выживаемость вируса ( S ) была подогнана к кинетике первого порядка в соответствии с уравнением 7 :

$$ \ mathrm {ln} \, [{\ rm {S}}] = — k \ раз D, $$

(1)

, где k — константа скорости УФ-инактивации или коэффициент восприимчивости (см 2 / мДж). Регрессия была выполнена с параметром точки пересечения, установленным на ноль, что представляет собой определение 100% относительной выживаемости при нулевой дозе УФ-излучения.95% доверительные интервалы начальной загрузки для параметра k были рассчитаны с использованием программного обеспечения R 3.2.3 41 . Поперечное сечение инактивации вируса, D 95 , которое представляет собой УФ-дозу, которая инактивирует 95% подвергшегося воздействию вируса, было рассчитано как D 95 = -ln [1 — 0,95] / k .

Все, что вам нужно знать в 2019 году (включая стратегии) ​​

Оценка релевантности Facebook позволяет оценить, насколько хорошо ваша реклама находит отклик у вашей целевой аудитории.

Чтобы получить эту оценку, Facebook просматривает черновик вашего объявления, учитывает потенциальные положительные и отрицательные отзывы аудитории и сводит их к баллам от 1 до 10.Как только объявление будет опубликовано, ваша оценка обновится на основе полученных отзывов.

По сути, чем выше ваша оценка, тем больше вероятность, что Facebook покажет вашу рекламу нужной аудитории. И, как дополнительный бонус, вы увидите немного более низкие затраты на рекламу.

I В 2019 году Facebook начал развертывание нового набора диагностики релевантности, который разбивает оценку релевантности на три отдельных измерения:

Рейтинг качества, рейтинг вовлеченности и рейтинг коэффициента конверсии.

В этом посте мы разберем, что означает каждый из этих новых рейтингов, и предложим вам стратегии, которые помогут вам извлечь выгоду из дополнительной информации, которую предоставляют рейтинги.

Диагностика релевантности и ее значение

В отличие от других показателей, показатель релевантности Facebook и новая диагностика релевантности помогают понять желания и потребности целевой аудитории, а не просто показывают успех или неудачу вашей рекламы. Если вы знаете, как правильно использовать эти оценки, вы можете поучиться на своих неэффективных объявлениях.

Заявление об отказе от ответственности: Вы не сможете увидеть диагностику релевантности для объявлений с числом показов менее 500.

Используя информацию, собранную не менее чем из 500 показов, Facebook формирует обоснованный рейтинг, который они разделяют на один из пяти различных уровней:

  • Выше среднего (55 процентиль и выше)
  • Среднее значение (с 35-го по 55-й процентиль)
  • Ниже среднего (Нижние 35% объявлений)
  • Ниже среднего (нижние 20% объявлений)
  • Ниже среднего (нижние 10% объявлений)

Повышение в этом рейтинге увеличит вероятность показа вашей рекламы нужной аудиторией.

И согласно Facebook:

Более эффективно переместить рейтинг от низкого к среднему, чем переместить рейтинг от среднего к выше среднего, поэтому сосредоточьтесь на улучшении низкого рейтинга, а не на улучшении среднего рейтинга ».

Вот краткое изложение того, что означает каждая диагностика и что вы можете сделать, чтобы увеличить ее:

Рейтинг качества

Это позволяет ранжировать воспринимаемое качество ваших объявлений по сравнению с другими объявлениями, конкурирующими за ту же аудиторию.Другими словами, он показывает, как ваша аудитория думает о вашей рекламе в отличие от рекламы ваших конкурентов в то время.

Facebook рассчитывает этот рейтинг на основе отзывов пользователей, которые просматривали или скрывали рекламу в своих лентах. Это не то же самое, что сообщить о рекламе, отреагировать на нее или поделиться ею. Facebook использует только данные, собранные из намеренно скрытой рекламы.

Пример отзыва, который может быть предоставлен по объявлению, скрытому на Facebook.

В дополнение к этой обратной связи Facebook делает оценки, связанные с приманкой для кликов, приманкой для вовлечения и другим плохим пользовательским опытом.

Любая реклама, которую алгоритмы Facebook считают неудобной для пользователей, например, неполная целевая страница или неточное изображение вашего бренда, может снизить вашу оценку. Просто убедитесь, что вы следуете правилам размещения рекламы Facebook, и все будет в порядке.

Но эти правила не касаются приманки для кликов или приманки для вовлечения, которые также являются важными факторами в том, как Facebook оценивает вашу рекламу.

Если вы спрашиваете себя, в чем разница между кликбейтом и приманкой для вовлечения, мы это проясним и для вас:

  • Clickbait — это реклама, которая намеренно оставляет или преувеличивает важные детали истории, чтобы побудить пользователей Facebook перейти по ссылке.Обычно это приводит к высокому показателю отказов:

Пример видеорекламы Clickbait через Facebook.

  • Приманка для вовлечения — это реклама, которая напрямую запрашивает лайки, публикации и комментарии, чтобы повысить свою позицию в ленте:

Примеры приманок для помолвки через Facebook.

Рейтинг вовлеченности

Это позволяет сравнить ожидаемый коэффициент взаимодействия вашего объявления с другими объявлениями, конкурирующими за ту же аудиторию. Другими словами, он показывает, насколько вероятно, что ваша целевая аудитория отреагирует, поделится, прокомментирует или расширит вашу рекламу в своей ленте.

Это отличный показатель для оценки привлекательности дизайна вашей рекламы для конкретной целевой аудитории. Рассмотрим этот пример из Facebook относительно таргетинга:

Показывает одну и ту же рекламу трижды, но с разной целевой аудиторией. Посмотрите, как показатель релевантности увеличивается с 2 до 5 и, наконец, до 8 по мере того, как таргетинг становится более конкретным?

Объявление хорошо продумано и понятно, поэтому хороший таргетинг на аудиторию является ключом к повышению рейтинга вовлеченности. Но помните: не участвуйте в заманивании, потому что это отрицательно скажется на вашем общем рейтинге.

Заявление об ограничении ответственности. Рейтинг по коэффициенту вовлеченности недоступен для некоторых целей оптимизации, включая время запоминаемости рекламы, количество показов, охват, конверсии или ценность клиентов.

Рейтинг конверсии

Это ранжирует потенциальный коэффициент конверсии для вашей рекламы на основе других конкурирующих объявлений для вашей аудитории. По сути, это показатель того, насколько вероятно, что человек достигнет цели вашего объявления, будь то переход на целевую страницу или, например, заполнение опроса.

Он рассчитывается на основе целей оптимизации или конверсии, установленных для ваших объявлений, и поэтому является наиболее отраслевым и переменным рейтингом:

В каждой отрасли, естественно, будут разные цели кампании. Например, из-за того, что при совершении покупки требуется более высокое внимание, дорогие или предметы роскоши, вероятно, будут иметь более низкий коэффициент конверсии, чем более дешевые или бюджетные предметы. Понимание ваших конкретных целей и стратегии подкрепляет ценность этого рейтинга.

Заявление об ограничении ответственности. Рейтинг по коэффициенту конверсии недоступен для некоторых целей оптимизации, включая повышение запоминаемости рекламы, количество показов, охват, конверсии или ценность клиентов.

Как проверить диагностику актуальности

Добавьте эту новую диагностику релевантности в столбец «Эффективность», настроив столбцы. Это просто:

И добавьте желаемую диагностику релевантности в представление по умолчанию.

Как только это будет сделано, просто зайдите в Менеджер рекламы Facebook, выберите кампанию, а затем набор объявлений.На вкладке «Объявления» вы увидите список объявлений, каждое из которых будет иметь собственный показатель релевантности и диагностику.

AdEspresso упрощает просмотр вашей оценки релевантности.

Просто выберите кампанию, чтобы открыть панель управления кампанией:

Оказавшись там, прокрутите вниз. Внизу удобная диаграмма, показывающая показатель релевантности и вовлеченность вашей кампании с течением времени.

Чтобы увидеть свой показатель релевантности для определенных объявлений в вашей кампании, переключитесь в режим просмотра «Все объявления» в меню кампании:

Для каждого объявления вы можете увидеть показатель релевантности в правом столбце.

Теперь вы знаете, где найти информацию. Но что делать дальше? Продолжай читать.

Что это значит для вас?

По мере того, как Facebook продолжает развертывать эту диагностику релевантности для остальных пользователей, у вас будет возможность узнать больше о том, как ваша целевая аудитория думает о каждой создаваемой вами рекламе, что поможет вам создавать более качественные объявления и оптимизировать текущие кампании для получения более высоких результатов. представление.

У

Facebook есть отличная разбивка того, как использовать эти рейтинги для создания лучшей рекламы для вашей целевой аудитории:

Как видите, в зависимости от того, в какой категории вы находитесь ниже среднего, вы можете быстро увидеть, где можно внести изменения.

Это отличное дополнение к существующей оценке релевантности Facebook и лучшие данные о том, что действительно находит отклик у вашей целевой аудитории.

Если вы хотите узнать больше о текущем рейтинге релевантности Facebook, прочтите сообщение под нашим обновлением.

А если вы хотите сразу перейти к разделу стратегий, нажмите здесь.


Оценка релевантности: все, что вам нужно знать в 2017 году (включая стратегии) ​​

В 2015 году Facebook Ads Manager представил приятную новую функцию: показатель релевантности.Если вы когда-либо хотели с первого взгляда определить, насколько хорошо ваше объявление соответствует своей аудитории, показатель релевантности поможет вам. Сама по себе метрика проста: оценка 1–10–10 означает, что ваша целевая аудитория считает вашу рекламу очень соответствующей ее интересам и потребностям.

Но что именно определяет вашу оценку релевантности? Facebook говорит, что все сводится к «положительным и отрицательным отзывам» аудитории, но как вы интерпретируете это, чтобы улучшить свою рекламу? Здесь мы подробно разбираем, как именно работает ваша оценка релевантности., и этого мало! Мы также предложим лучших стратегии для достижения цели вашей кампании и улучшения результатов.

Уже понимаете, как работают оценки релевантности? Нажмите здесь и перейдите к некоторым стратегиям, чтобы увеличить свой счет!

Что такое оценка релевантности и почему она имеет значение?

Оценка релевантности — это магическое число. Это оценка от 1 до 10, которая на первый взгляд позволяет понять, насколько реклама актуальна для своей аудитории.

Обратите внимание на формулировку.Актуальность, а не качество.

Целью этого числа не является то, чтобы сказать вам, насколько хороши ваше изображение или копия. Основная цель здесь — дать вам понять, учитывает ли демографическая цель вашего объявления ваше сообщение, имеющее отношение к ним, и, таким образом, взаимодействует с ним.

Объявление, сделанное лучшим дизайнером в мире с лучшей копией из когда-либо написанных, все равно получит недостаточную оценку, если оно продвигает женскую одежду и нацелено на подростков мужского пола 13–18 лет.

С другой стороны, реклама с приличным дизайном и копией, нацеленной на идеальную аудиторию, получит здоровую оценку релевантности .

Вот пример из Facebook:

Вы можете спросить: « Почему это имеет значение? Это всего лишь цифра. »Это гораздо больше, чем просто число. Рейтинг релевантности — это синтез многих показателей: вовлеченности, кликов, конверсий, рейтинга кликов, отрицательных отзывов. С помощью всего одного числа вы можете быстро понять, будет ли объявление выигрышным или проигрышным.

Рейтинг релевантности также имеет прямую ссылку на ваши рекламные расходы .Когда Facebook должен решить, какую рекламу показывать конкретному пользователю, они всегда предпочтут показывать рекламу, которую они считают релевантной для этого пользователя. Если у вас нет, то реклама быстро станет очень дорогой.

Не верите? Просто смотри.

У этого рекламного объявления, который мы показывали, был плохой таргетинг, и мы стоили нам в среднем 0,142 долларов за клик на веб-сайте. Оценка релевантности — 2,9.

Это то же самое объявление, но с таргетингом на пользовательскую аудиторию веб-сайта, состоящую из пользователей, которые посетили наш веб-сайт за последние 90 дней .Рейтинг релевантности равен 8, что означает, что стоимость клика на веб-сайт составляет 0,03 доллара США !

При том же бюджете мы генерируем в 4 раза больше кликов . 1103 клика по этому сообщению в блоге по сравнению с 278 кликами в другой кампании. Доли, лайки и лайки страницы тоже зашкаливают! Это лишь один пример того, насколько важна оценка релевантности.

Как проверить оценку релевантности

Это очень просто. Просто зайдите в Менеджер рекламы Facebook, выберите кампанию, а затем AdSet.На вкладке «Объявления» вы увидите список объявлений, каждое из которых будет иметь собственный показатель релевантности.

AdEspresso упрощает просмотр вашей оценки релевантности! Просто выберите кампанию, чтобы открыть панель управления кампанией.

Когда вы перейдете на панель управления кампанией, просто прокрутите вниз. Внизу удобная диаграмма, показывающая показатель релевантности и вовлеченность вашей кампании с течением времени.

Чтобы увидеть показатель релевантности для определенных объявлений в вашей кампании, переключитесь в режим просмотра «Все объявления» в меню кампании.

Для каждого объявления вы можете увидеть показатель релевантности в правом столбце. Давайте перейдем к выяснению, что это значит!

Время данных! Что означает для вас оценка релевантности и что на нее влияет

Теперь, когда у вас есть хорошее представление о рейтинге релевантности рекламы в Facebook, давайте проверим некоторые данные.

Мы проанализировали подмножество нашей базы данных: 104 256 объявлений, созданных с помощью AdEspresso за 45 дней после того, как была впервые введена оценка релевантности.

Сначала мы проверили раздачу.Я ожидал увидеть классическую колоколообразную кривую с оценкой большинства объявлений от 4 до 5. Оказывается, наши клиенты потрясающие, и 63% объявлений получили оценку 6 или более . 8 был немного наиболее частым показателем релевантности.

Приятно видеть, что большая часть рекламы ориентирована на релевантную аудиторию.

Я уже упоминал, что релевантность ваших объявлений повлияет на готовность Facebook отображать их в лентах новостей пользователей и, следовательно, на то, сколько это будет стоить.

Давайте посмотрим на цифры, чтобы доказать это:

Оценка Объявления CPC CTR Среднее количество акций В среднем Среднее количество комментариев Ср.Переходы на веб-сайт
1 3 682 $ 0,95 0.60% 3 13 2 231
2 6 534 $ 0,39 0,80% 2 19 1 137
3 8 205 $ 0,33 0,88% 2 41 1 138
4 9 070 0 руб.37 1,04% 4 52 3 119
5 10 231 $ 0,27 1,18% 35 222 39 286
6 11 838 $ 0,21 1,40% 66 231 78 431
7 13,726 0,19 долл. США 1,67% 71 214 80 537
8 14 749 0 руб.15 2% 88 138 43 516
9 14 576 $ 0,09 2,94% 71 83 14 945
10 11 645 $ 0,03 7,61% 170 111 44 2,215

Именно то, что мы ожидали. Чем выше показатель релевантности, тем ниже цена за клик (CPC) и выше показатель CTR. .

Разница действительно велика, если вы достигнете показателя релевантности 10 — цена за клик чрезвычайно низкая, и эти объявления вызвали огромное количество кликов.

Следующий вопрос: так ли хороши CTR и CPC из-за высокого показателя релевантности или наоборот? Я склоняюсь к последнему.

Рейтинг релевантности не является отдельным показателем, как количество кликов или показов, он рассчитывается. Рейтинг релевантности не может повлиять на количество кликов, которые получит объявление.Как раз наоборот.

Если объявление Facebook имеет отличный дизайн и нацелено на нужную аудиторию, у него будет очень хороший CTR и уровень вовлеченности. Это приведет к более низкой цене за клик и более высокому баллу релевантности.

Оценка релевантности далеко не бесполезна, и в определенной степени вы можете избежать проверки нескольких показателей и просто сосредоточиться на оценке релевантности, чтобы понять, какие объявления работают лучше всего.

Наконец, вот сводка из показателей, которые больше всего влияют на показатель релевантности :

  • Отрицательные сигналы : когда пользователь скрывает вашу рекламу от своей ленты новостей, это явный индикатор того, что вы не нацелены на нужную аудиторию.
  • Цель кампании : Я думаю, что это самое сильное положительное влияние, которое вы можете получить. Если ваша кампания нацелена на лайки, и вы получаете много лайков, это хороший знак. То же самое касается конверсий, переходов на веб-сайт и т. Д. Чем лучше вы добьетесь цели своей кампании, тем выше будет ваш результат.
  • CTR : чем выше ваш рейтинг кликов, тем более релевантным ваше объявление считает Facebook. Это здравый смысл, поскольку никто не будет нажимать на рекламу, не имеющую отношения к нему.
  • Акции : Моя теория состоит в том, что Facebook считает, что совместное использование рекламы является самым сильным подтверждением ее качества. Приведенные выше цифры, кажется, подтверждают эту теорию с довольно сильной корреляцией между долями и оценками.
  • Отметки «Нравится» и комментарии : Хотя данные не показывают четкой корреляции, я думаю, что Facebook считает отметки «Нравится» и комментарии как положительные сигналы качества. Комментарии могут быть немного сложнее, потому что без понимания контекста трудно приписать им положительное или отрицательное значение.

4 стратегии повышения рейтинга релевантности вашей рекламы в Facebook

Помните, что это такое: релевантность.

Чтобы повысить свой показатель релевантности, вам просто нужно создать привлекательную рекламу, которая напрямую отвечает потребностям и желаниям вашей очень конкретной аудитории.

Вот четыре действенных стратегии для улучшения рейтинга релевантности рекламы в Facebook:

№1. Снизьте частоту показа объявлений

Вас когда-нибудь раздражало, сколько раз в вашем фиде появляется одно и то же объявление? Заманчиво просто заблокировать вещь.

Вот что чувствуют ваши зрители, когда частота показа вашей рекламы , среднее количество раз, когда человек видит вашу рекламу, слишком высока.

Мы обнаружили, что чем выше частота, тем выше ваша цена за клик (CPC) и тем ниже ваш рейтинг кликов (CTR).

На графике ниже показаны наши результаты анализа 500 кампаний за несколько месяцев. Обратите внимание, как резко увеличивается цена за клик, когда частота достигает 5.

Как только люди начнут видеть ваше объявление слишком много раз, вы поймете, что пора обновить дизайн.

Не существует точной и быстрой частоты, которую можно было бы использовать в качестве порогового значения, потому что кампании у всех разные, а частота является лишь средней.

Но, редактируя объявления, имейте в виду, что вы должны искать баланс между производством впечатления на людей и тем, чтобы не раздражать их повторением рекламы.

Сохранение актуальности ваших объявлений особенно важно для предотвращения блокировки или «скрытия», которые могут снизить показатель релевантности вашего объявления.

Еще один способ снизить частоту показа объявлений — перейти в пользовательские аудитории и исключить людей, которые уже обратились в ваш бизнес.

Если цель вашей рекламы — увеличить количество конверсий, то показ вашей рекламы людям, которые уже совершили конверсию, может только их раздражать.

Частота — хороший индикатор того, когда ваши объявления находятся на грани получения отрицательных отзывов. , что снижает показатель релевантности вашего объявления.

№2. Дизайн рекламы на основе образа покупателя

Повышение рейтинга релевантности — это все, что нужно для того, чтобы ваше объявление соответствовало вашей аудитории.

Чем более подробно описаны ваши покупатели, тем больше вы должны работать в своем рекламном дизайне с нишевой аудиторией.

Чтобы создать отличного покупателя, сначала определите разных покупателей с максимально возможным количеством демографических характеристик — Facebook Audience Insights может дать вам представление о категориях, из которых можно выбирать.

Затем определите болевые точки вашего клиента с помощью исследования клиентов или даже анализа конкурентов. Вы можете превратить эти болевые точки в сильное ценностное предложение, которое будет размещено в вашей рекламе.

Последний шаг — разработать рекламу для каждого покупателя, включив эти демографические данные и болевые точки.

Ниже приведены два примера рекламы, которые мы создали для двух покупателей: агента цифрового маркетинга (слева) и начинающего предпринимателя (справа).

Обратите внимание, что в каждом рекламном объявлении упоминается в центре внимания конкретной болевой точки клиента. Для стартапов это рост, а для маркетинга пора.

Имея в виду покупателя, легко создать свое объявление, которое будет содержать уникального ценностного предложения для каждого сегмента вашей целевой аудитории.

Хорошо продуманная нишевая реклама приводит к большему количеству переходов по ссылкам, что, в свою очередь, увеличивает ваш показатель релевантности.

№3. Стремитесь к аудитории с пересекающимися интересами

На ваш показатель релевантности влияет

CTR — чем выше ваш CTR, тем выше ваш рейтинг.

Однако это не значит, что вам нужно делать кликбейт для рекламы.

Элегантный и эффективный способ заставить людей нажимать на ваши объявления — это нацеливать людей с несколькими пересекающимися интересами , которые представляет ваш продукт .

Это означает, что если вы что-то рекламируете, скажем, футбольное мероприятие в колледже с бесплатными тако, то фокус в том, чтобы нацелиться на пользователей, которым нравится и футбол, и тако.Просто введите различные темы в раздел «Интересы» Менеджера рекламы Facebook и выберите «все эти» интересы, чтобы получить свое пересечение.

Таргетинг на пользователей, которые соответствуют всем этим интересам, сократит вашу аудиторию до тех, кто на самом деле получит удовольствие от вашего мероприятия, и, следовательно, с большей вероятностью будет взаимодействовать с ним через щелчок или ответный запрос.

Высокий CTR улучшает все цели кампании, будь то продвижение мероприятия, привлечение трафика на ваш сайт или снижение продаж по каталогу товаров.

И знаете что? Чем лучше ваше объявление достигает целей вашей кампании, тем выше ваш показатель релевантности.

№4. Показывайте рекламу в стратегическое время

Чтобы повысить показатель релевантности, вам нужно сократить время показа объявлений. Это потому, что ваш продукт, вероятно, будет более актуальным в определенное время дня, а не в другое.

Выбор лучшего времени для показа рекламы зависит от поведения вашего сегмента аудитории.

Например, реклама горячего обеда будет более актуальной для большинства людей во время обеда, чем среди ночи.Услуги по редактированию сочинений будут казаться студентам более привлекательными, когда они не ложатся спать в час ночи.

Как только вы поймете поведение и болевые точки своей целевой аудитории, вы сможете оптимизировать, когда ваше объявление появится в их фиде.

Чтобы определить оптимальное время для публикации объявления, используйте аналитические инструменты Facebook или инструменты, такие как Hootsuite, чтобы проверить отметки времени, когда люди наиболее заинтересованы.

Ниже мы покажем, как эта аналитика может выглядеть для взаимодействия с публикациями:

Как только вы обнаружите, что ваше объявление не работает (когда люди не проявляют особого интереса), вы приостанавливаете его на это время.

В AdEspresso это очень легко сделать с помощью функции «Время суток», , которая позволяет вам планировать время проведения кампании как в вашем часовом поясе, так и за его пределами.

Такое планирование не только сэкономит вам деньги, но и обеспечит оптимальное отображение ваших объявлений. Это увеличивает ваши шансы на получение более положительных отзывов клиентов, что напрямую повышает вашу оценку релевантности.

Не забывай…

Есть много показателей, которые входят в вашу оценку релевантности, и может показаться, что их нужно отслеживать.

Помните, что редизайн рекламы никому не удается с первого раза. Проведите сплит-тест , чтобы найти оптимальное решение для вашей кампании.

Таким образом, вы можете уверенно масштабировать свою кампанию на основе наиболее эффективных объявлений с наивысшими показателями релевантности. Чтобы узнать больше о том, как проводить сплит-тестирование, мы вам поможем.

Еще одна вещь, которую следует запомнить: не зацикливайтесь на повышении своей релевантности !

В конце концов, это — это всего лишь оценка того, насколько хорошо ваша реклама находит отклик у зрителей.

Что еще важнее, так это основные показатели, которые способствуют росту вашего бизнеса.

Итак, если показатель релевантности вашего объявления низкий, но ваша кампания дает положительную рентабельность инвестиций, все результаты говорят о том, что у вас есть возможности для улучшения!

Теперь твоя очередь!

Я надеюсь, что эти данные, подтвержденные анализом показателя релевантности Facebook, помогли вам лучше понять, как он работает и какую пользу вы можете извлечь из этого.

Теперь ваша очередь проверить свои кампании и улучшить их.

Пока вы занимаетесь этим, почему бы не поделиться своими выводами в комментариях ниже? Каков ваш средний балл релевантности и что помогло его улучшить?

Сообщите нам, и мы сравним результаты!

Девственные β-клетки в неогенной нише пролиферируют нормально и созревают медленно

Abstract

Давно известно, что пролиферация β-клеток поджелудочной железы достигает своего пика на неонатальных стадиях и снижается в зрелом возрасте.Однако пролиферация β-клеток изучалась в предположении, что все β-клетки составляют единую гомогенную популяцию. Неизвестно, сохраняет ли субпопуляция β-клеток способность к более быстрому размножению и, таким образом, вносит непропорциональный вклад в поддержание массы зрелых β-клеток у взрослых. Поэтому мы оценили пролиферативную способность и потенциал обновления девственных β-клеток, новой популяции незрелых β-клеток, обнаруженных на периферии островков. Мы демонстрируем, что девственные β-клетки могут пролиферировать, но делают это со скоростью, аналогичной таковой для зрелых β-клеток с того же островка в нормальных и зараженных условиях.Скорость пролиферации девственных β-клеток также согласуется с возрастным снижением, о котором ранее сообщалось для β-клеток в целом. Мы также показываем, что девственные β-клетки представляют собой долгоживущие, стабильные субпопуляции β-клеток с низким превращением в зрелые β-клетки в здоровых условиях. Наши наблюдения показывают, что девственные β-клетки на периферии островков могут делиться, но не вносят непропорциональный вклад в поддержание массы взрослых β-клеток.

Введение

В настоящее время более 30 миллионов американцев страдают диабетом, который является результатом прогрессирующей потери β-клеток, вызванной либо аутоиммунной атакой, либо образом жизни и генетическими факторами (1).Поскольку β-клетки являются единственными клетками в организме, способными секретировать инсулин, основной терапевтической целью диабета является замещение β-клеток, потерянных во время болезни. Трансплантация островков или всей поджелудочной железы имела некоторый успех в достижении независимости от инсулина, но ограниченная доступность доноров, иммунологические осложнения и выживаемость трансплантата делают этот процесс нецелесообразным для большинства пациентов с диабетом (2). Таким образом, сохраняется большой интерес к стратегиям, которые способствуют регенерации β-клеток из различных источников клеток (3,4).Несмотря на эти усилия, клинически значимое восстановление массы β-клеток еще не достигнуто, что свидетельствует о постоянной потребности в стратегиях регенерации β-клеток.

Во время позднего развития поджелудочной железы масса β-клеток быстро увеличивается за счет саморепликации молодых β-клеток. Семенные эксперименты Дор и др. (5) путем последовательного мечения β-клеток установили, что саморепликация является основным механизмом поддержания массы β-клеток — вывод, который не вызывает сомнений (6,7). Однако пролиферация β-клеток быстро снижается с возрастом у мышей (8-10), при этом еще более низкие скорости пролиферации наблюдаются на островках человека (11), что усложняет задачу восстановления массы β-клеток вторично по отношению к связанной с диабетом потере β-клеток. .На этом фоне многочисленные сообщения об инсулин-положительных мультипотентных предшественниках (12,13), трансдифференцировке α- и δ-клеток в β-клетки (14–16), трансдифференцировке экзокринных клеток в β-клетки (17,18), и, совсем недавно, существование популяции островковых резидентных стволовых клеток, положительных по рецептору протеина C (ProCr) (19), продолжает повышать вероятность того, что существуют альтернативные пути генерации β-клеток, которые могут быть нацелены при диабете.

Добавив к этим потенциальным альтернативным источникам β-клеток, мы недавно идентифицировали новую популяцию незрелых β-клеток, которую мы назвали девственными β-клетками, поскольку исследования по отслеживанию клонов показали, что эти клетки экспрессируют инсулин, но никогда не экспрессируют маркер зрелости урокортин. 3 (Ucn3) (20).Девственные β-клетки встречаются исключительно вблизи периферии островка, которую мы поэтому назвали новообразованной нишей. Они составляют стабильную фракцию ~ 1,5% всех β-клеток и не имеют ключевых маркеров зрелости в дополнение к Ucn3, таких как G6pc2, MafA и Ero1lb (20). Девственные β-клетки также лишены экспрессии Glut2 на клеточной поверхности — свойства, которое они разделяют с β-клетками, которые встречаются небольшими кластерами за пределами обычных островков (21,22). Поскольку девственные β-клетки обладают многими чертами незрелых β-клеток во время позднего развития поджелудочной железы, это повышает вероятность того, что девственные β-клетки могут обладать относительно высокой скоростью пролиферации, подобной развивающимся незрелым β-клеткам.Однако способность девственных β-клеток к пролиферации, скорость, с которой они это делают, и потенциал их оборота остаются неизвестными.

В этом исследовании мы исследовали способность к пролиферации и потенциал созревания девственных β-клеток в новообразованной нише с помощью мечения ДНК и экспериментов по отслеживанию клонов методом импульсной погони. Мы предположили, что девственные β-клетки являются более пролиферативными, чем зрелые β-клетки, на основании их сходства с незрелыми β-клетками во время развития поджелудочной железы. Однако наши данные демонстрируют, что пролиферирующие β-клетки не чаще встречаются вблизи периферии островков, а вместо этого возникают случайным образом по поверхности поперечного сечения островков.Точно так же, когда мы специально рассмотрели скорость пролиферации девственных и зрелых β-клеток, мы наблюдали, что девственные β-клетки пролиферируют, но делают это со скоростью, аналогичной таковой для зрелых β-клеток из тех же островков в основных условиях и в ответ на метаболические такие проблемы, как беременность или экспериментально индуцированная инсулинорезистентность. В целом, из этого следует, что девственные β-клетки во взрослых островках представляют собой стабильную подгруппу β-клеток, которые демонстрируют ограниченное превращение в зрелые β-клетки.

Дизайн и методы исследования

Животные

Мышей содержали в групповом содержании при 12-часовом цикле свет / 12-часовая темнота со свободным доступом к воде и стандартному корму для грызунов.Мыши C57BL / 6 были приобретены у Envigo. Все процедуры на мышах были одобрены Комитетом по институциональному уходу и использованию животных Калифорнийского университета в Дэвисе (UC Davis) или Институтом биологических исследований Солка и выполнялись в соответствии с Законом о благополучии животных и Руководством Института исследований лабораторных животных. по уходу и использованию лабораторных животных.

Введение 5-этинил-2′-дезоксиуридина и S961

Мышам вводили один раз в день 5-этинил-2′-дезоксиуридин (EdU) (Life Technologies) внутрибрюшинно в дозе 50 мг / кг массы тела, растворенной в концентрации 10 мг / кг. мл в 0.9% физиологический раствор, как указано. EdU готовили в свежем виде прямо перед введением. S961 (NNC0069-0961) был щедро предоставлен Novo Nordisk Compound Sharing. Осмотические насосы (Alzet 2001), заполненные только 10 нмоль S961 или PBS, высвобождаемые в расчетной дозе 0,05 нмоль / ч, имплантировали подкожно.

Тест на толерантность к глюкозе

Мышей взвешивали после ночного голодания, а затем вводили болюс из 2 г / кг декстрозы (D9559; Sigma-Aldrich) посредством внутрибрюшинной инъекции. Уровни глюкозы в плазме собирали в течение 2-часового периода с использованием крови из хвостовой вены с помощью глюкометра OneTouch Ultra.

Изоляция островков

Островки выделяли путем инъекции 2 мл 0,8 мг / мл коллагеназы P (Invitrogen), растворенной в сбалансированном солевом растворе Хэнкса (HBSS) (Roche Diagnostics), в поджелудочную железу через общий желчный проток, в то время как ампула Фатер был зажат. Затем введенную поджелудочную железу собирали в дополнительных 2 мл коллагеназы, инкубировали при 37 ° C в течение 11 минут и диссоциировали путем осторожного встряхивания вручную с последующими тремя промываниями холодной HBSS, содержащей 5% сыворотки новорожденного теленка (NCS).Суспензию пропускали через нейлоновую сетку (размер пор 425 мм) (Small Parts, Inc.), и островки выделяли центрифугированием в градиенте плотности в градиенте Histopaque (1,077 г / мл) (Sigma-Aldrich) в течение 20 минут при 1400 г без тормоза. Островки собирали с поверхности раздела, один раз промывали холодным HBSS, содержащим 5% NCS, и несколько раз отбирали вручную под препарирующим микроскопом перед культивированием в среде RPMI (Roche Diagnostics), содержащей 5,5 ммоль / л глюкозы, 10% FBS и пенициллин-стрептомицин. (Гибко).

Проточная цитометрия

mIns1 -h3b-mCherry × Островки Ucn3 -EGFP были выделены, как описано за день до диссоциации, путем инкубации в 0,25% трипсин-ЭДТА (Gibco) в течение 2 минут, дополненных мягким растиранием с p200. пипетку, промывали один раз в HBSS (Roche Diagnostics), содержащем 5% NCS, а затем окрашивали для выявления EdU с использованием модифицированного набора для проточной цитометрии Click-iT Plus EdU (C10634; Thermo Fisher Scientific) в соответствии с рекомендациями производителя и немедленно обрабатывали цитометр.Все данные о потоках были собраны с помощью Beckman Coulter CytoFLEX, за исключением когорты 9-месячного возраста на фиг. 3 C из-за неожиданных технических проблем с CytoFLEX; Для сбора данных использовался Beckman Coulter Astrios EQ, эквивалентный CytoFLEX.

Рисунок 3

Пролиферация девственных β-клеток снижается с возрастом со скоростью, аналогичной таковой для зрелых β-клеток с того же островка. Стратегия проточной цитометрии для идентификации и различения копозитивных зрелых β-клеток mCherry и EGFP, одноположительных девственных β-клеток mCherry и всех других не-β-клеток из островков репрезентативной особи mIns1 -h3b-mCherry × Ucn3 -EGFP мышь после диссоциации на суспензии отдельных клеток через 1 месяц ( A ), 3 месяца ( B ) и 9 месяцев ( C ) с гистограммами данных потока, иллюстрирующими процент EdU-положительных и EdU- отрицательные девственные и зрелые β-клетки. D : Количественная оценка суточной скорости пролиферации зрелых (зеленые столбцы) и девственных (красные столбцы) β-клеток в разные моменты времени ( n ≥ 6 мышей на группу). Суточную скорость пролиферации рассчитывали путем деления процента EdU-положительных зрелых или девственных β-клеток на период мечения (14 дней) и выражали как общий процент за день (формула адаптирована из 9). Открытые круги, самки; замкнутые круги, кобели. Данные анализировали на предмет статистической значимости с помощью двустороннего дисперсионного анализа с поправкой на множественные сравнения с помощью метода Тьюки.Планки погрешностей представляют ± SD. нс, не имеет значения.

Трехмерная визуализация интактных островков

Островок, выделенных из mIns1 -h3b-mCherry × Ucn3 Мышей -EGFP, которым вводили EdU in vivo, культивировали на непокрытой поверхности. 1,5 чашки со стеклянным дном диаметром 35 мм (MatTek Corporation) в среде RPMI (Roche Diagnostics), содержащей 10% FBS, 5,5 ммоль / л глюкозы и пенициллин-стрептомицин. Островкам давали прикрепиться к стеклянному дну в течение двух ночей перед фиксацией 4% параформальдегидом (EMD Millipore) в течение 15 минут с последующим окрашиванием EdU с помощью набора Click-iT Plus EdU Cell Proliferation Kit (C10640; Thermo Fisher Scientific) в соответствии с рекомендациями производителя. и затем отображены в координатах x, y и z на конфокальном микроскопе Nikon A1R +.

Pulse-Chase

минут Мышей -CreER

минут -CreER × lsl -mT / mG мышей лечили через желудочный зонд тамоксифеном 125 мг / кг массы тела (T5648; Sigma-Aldrich), растворенным в 20 мг / мл в подсолнечном масле. Панкреату собирали при эвтаназии, фиксировали 4% параформальдегидом в течение 5 часов на льду, защищали 30% сахарозой в течение 24 часов при 4 ° C, заливали в O.C.T. Компаунд (Fisher Healthcare), обработанный до толщины 14 мкм с помощью криостата Leica CM3050 S.

Иммунофлуоресценция

Иммунофлуоресценция проводилась следующим образом: предметные стекла промывали три раза по 5 мин каждое в фосфатно-солевом растворе на основе калия (KPBS), а затем инкубировали с первичными антителами, разведенными в блоке осла (KPBS с добавлением 2% ослиной сыворотки и 0.4% Triton X-100) в течение ночи при 4 ° C. Затем предметные стекла промывали еще три раза в KPBS и инкубировали со вторичными антителами (Jackson ImmunoResearch), используемыми в разведении 1: 600 в ослином блоке, в течение 45 минут при комнатной температуре. Предметные стекла были промыты еще три раза перед контрастным окрашиванием DAPI, где это применимо, и заливкой в ​​ProLong Gold Antifade (Thermo Fisher Scientific). Изображения были получены с помощью конфокального микроскопа Nikon A1R + или автоматического микроскопа Keyence для данных, представленных на рис.1.

Рисунок 1

Пролиферирующие EdU-положительные β-клетки случайным образом распределяются по островку. A : Схема временной шкалы введения EdU мышей C57BL / 6. Репрезентативные изображения иммунофлуоресценции срезов ткани поджелудочной железы от 4-недельных ( B ) и 9-месячных ( C ) мышей, окрашенных инсулином (красный), EdU (зеленый) и DAPI (синий). Стрелки указывают примеры β-клеток, которые являются положительными для обнаружения мечения EdU. D : Нормализованное кумулятивное распределение EdU-положительных (синий) и EdU-отрицательных (красный) β-клеток в 4-недельных островках мыши. E : Распределение EdU-положительных (синий) и EdU-отрицательных (красный) β-клеток в островках 9-месячной мыши. Для каждого графика распределения n, ≥ 3 мышей с подсчетом от восьми до девяти островков на животное. отрицательный, отрицательный; поз., полож.

Первичные антитела включают антиинсулин морской свинки (каталожный номер A0564, 1: 500; Dako), крысиный антиинсулин (MAB1417, 1: 500; R&D Systems), анти-Ucn3 морской свинки (044, 1: 1000). ) и кроличьи анти-Ucn3 (7218, 1: 1000) (предоставлены доктором Уайли Вейл, Институт биологических исследований Солка) (23) и кроличий антиглюкагон (2760S, 1: 400; Cell Signaling Technology).Click-iT Plus EdU Cell Proliferation Kit (C10637; Thermo Fisher Scientific) использовался для обнаружения EdU в срезах ткани поджелудочной железы.

Подсчет клеток и статистический анализ

Изображения были проанализированы и подсчитаны вручную с помощью Fiji / ImageJ. Количество биологических повторов ( n ), мера центральной тенденции (среднее значение, процент), планки ошибок и статистический анализ, выполненный с помощью GraphPad Prism, версии 8.0, поясняются в подписях к рисункам. Различия считались значимыми, когда P <0.05.

Доступность данных и ресурсов

Все данные, полученные или проанализированные в ходе этого исследования, в совокупности включены в публикуемую статью. Базовые наборы данных, созданные во время и / или проанализированные в ходе текущего исследования, доступны у соответствующего автора по разумному запросу. Применимые ресурсы не были получены или проанализированы в ходе текущего исследования.

Результаты

Пролиферирующие β-клетки случайным образом распределены по островку

Из-за преимущественного расположения девственных β-клеток на периферии островка в сочетании с их фенотипическим сходством с молодыми β-клетками, которые пролиферируют относительно быстро, мы были заинтересованы в том, чтобы оценка пространственного распределения пролиферирующих β-клеток внутри островка.Для этого мы обработали восемь мышей C57BL / 6 аналогом тимидина EdU через 4 недели ( n = 3) и 9 месяцев ( n = 5) за 3 дня до сбора (рис. 1 A ). Затем поджелудочную железу каждого животного окрашивали на EdU и инсулин, чтобы маркировать все пролиферирующие β-клетки (фиг. 1 B и C ). Затем мы количественно определили относительное положение ~ 22000 индивидуальных β-клеток из обеих возрастных групп и нормализовали его по размеру островков, метод, который мы ранее использовали с использованием специального алгоритма, который мы разработали для этой цели (20).Идентичность каждой β-клетки определялась вручную. Нормализованное кумулятивное распределение EdU-положительных и EdU-отрицательных β-клеток не выявило предпочтительного распределения делящихся β-клеток по островку (рис. 1 D и E ), что позволяет предположить, что пролиферирующие β-клетки не возникают преимущественно. в любом конкретном месте на острове. Пространственное расположение отдельных β-клеток не влияет на их способность к пролиферации, что основано на предыдущем наблюдении, что все β-клетки гомогенны в отношении их пролиферативной способности (24).

Девственные β-клетки пролиферируют со скоростью, аналогичной пролиферации зрелых β-клеток

Хотя наш первоначальный эксперимент EdU не выявил накопления делящихся β-клеток на периферии островка, где обнаружены девственные β-клетки, он также не показал напрямую различают зрелые и девственные β-клетки. Поэтому мы иммуноокрашивали срезы поджелудочной железы 3-недельных мышей дикого типа ( n = 2), получавших EdU в течение 3 дней перед сбором. Окрашивание инсулином и Ucn3 позволило различить девственные и зрелые β-клетки.EdU-положительные девственные β-клетки, на что указывает отсутствие экспрессии Ucn3 и расположение на краю островка, легко обнаруживались на этих островках (фиг. 2 A ). Чтобы подтвердить это независимо от иммунофлуоресценции и преодолеть трудности, связанные с обнаружением относительно редкого события (пролиферации β-клеток) в относительно небольшой популяции первичных β-клеток, мы разработали новый подход для количественной оценки пролиферации β-клеток с помощью строгой количественной оценки. и высокопроизводительный способ с использованием проточной цитометрии. Проточная цитометрия также имеет дополнительное преимущество, так как позволяет избежать потенциальных предубеждений при обнаружении пролиферирующих β-клеток, которые возникают при обнаружении пролиферации β-клеток с помощью иммунофлуоресценции.Для этого мы скрестили mIns1, -h3b-mCherry (25) с репортерными мышами Ucn3 -EGFP (20). У битрансгенных потомков этого скрещивания девственные β-клетки обнаруживаются как одноположительные β-клетки mCherry на периферии островка, тогда как зрелые β-клетки являются дважды положительными для EGFP и mCherry (20). Эта уникальная модель на мышах позволила нам количественно определить, пролиферируют ли девственные β-клетки со скоростью, отличной от скорости зрелых β-клеток из тех же островков в данном возрасте. Мы пролечили 22 мышей mIns1 -h3b-mCherry × Ucn3 -EGFP через 4 недели ( n = 8), 3–4 месяца ( n = 8) и 9 месяцев ( n = 6). с EdU за 2 недели до сбора (рис.2 В ). Визуализация целых островков с помощью конфокальной микроскопии в трех измерениях после обнаружения EdU легко выявила множественные одноположительные девственные β-клетки mCherry и двойные положительные зрелые β-клетки mCherry и EGFP с ядерной меткой EdU (рис.2 C ), демонстрируя, что Обнаружение EdU эффективно отмечает пролиферирующие девственные и зрелые β-клетки. Чтобы количественно определить долю EdU-положительных и EdU-отрицательных девственных и зрелых β-клеток, мы выделили и диссоциировали островки в конце мечения EdU in vivo с последующим обнаружением EdU и количественной оценкой всех β-клеток от отдельных мышей с помощью проточная цитометрия (рис.3 A – C ). Наши данные потока продемонстрировали, что девственные β-клетки пролиферируют со скоростью, аналогичной скорости пролиферации зрелых β-клеток с тех же островков через 4 недели, 3 месяца и 9 месяцев, и со скоростью, которая снижалась с возрастом (рис. 3 D ). , в соответствии с предыдущими наблюдениями за пролиферацией β-клеток в целом (8-10).

Рисунок 2

Девственные β-клетки могут пролиферировать. A : Двумерное репрезентативное изображение 3-недельного островка мыши дикого типа, иммуноокрашенного инсулином (красный), Ucn3 (белый), EdU (зеленый) и DAPI (синий).Голубая стрелка указывает на пролиферирующую EdU-положительную зрелую β-клетку, которая экспрессирует Ucn3, а желтая стрелка указывает на пролиферирующую EdU-положительную девственную β-клетку, у которой отсутствует экспрессия Ucn3. B : Схема временной шкалы введения EdU мышей mIns- h3b-mCherry × Ucn3- EGFP. C : Трехмерное репрезентативное изображение 1-месячного островка мыши mIns- h3b-mCherry × Ucn3 -EGFP, окрашенного для обнаружения EdU (белый). Желтые стрелки указывают на одноположительные делящиеся девственные β-клетки mCherry.Голубые стрелки указывают на двойные делящиеся зрелые β-клетки mCherry и EGFP.

Скорость пролиферации девственных β-клеток увеличивается при метаболической нагрузке

Затем мы исследовали скорость пролиферации девственных и зрелых β-клеток в условиях заражения, в частности, во время беременности и перед лицом инсулинорезистентности. Это условия, при которых известно, что β-клетки мыши размножаются за счет самораспространения (26,27). Мы хотели определить, будут ли девственные β-клетки также увеличивать свою пролиферацию и вносить такой же вклад, как и зрелые β-клетки в этих сложных условиях, чтобы удовлетворить повышенную потребность в инсулине.Беременным мышам C57BL / 6 ( n = 5) вводили EdU в течение 12-16 дней гестации, а затем собирали и делали срезы для гистологического анализа (рис. 4 A ). Пролиферирующие девственные и зрелые β-клетки, идентифицированные окрашиванием на инсулин, Ucn3 и EdU, были обнаружены в большем количестве на островках беременных по сравнению с небеременными мышами (фиг. 4 B ). Кроме того, количество EdU-положительных девственных и зрелых β-клеток не различается в островках беременных, что позволяет предположить, что скорости пролиферации этих двух подтипов β-клеток во время беременности схожи (рис.4 С ).

Рисунок 4

Пролиферация девственных β-клеток увеличивается аналогично пролиферации зрелых β-клеток во время беременности. A : Схема временной шкалы введения EdU беременных самок мышей C57BL / 6. Репрезентативные изображения островков у 12-недельной небеременной (Non-P) мыши ( B ) и беременной мыши на 16-й день беременности (G16) ( C ), иммуноокрашенных инсулином (белый), Ucn3 (красный ), EdU (зеленый) и DAPI (синий). Голубые стрелки указывают на пролиферирующие EdU-положительные зрелые β-клетки, а желтые стрелки указывают на пролиферирующие EdU-положительные первичные β-клетки. D : Количественное определение доли девственных β-клеток между небеременными и беременными мышами G16 ( n = 5 на группу). Значения над каждой полосой указывают общее количество первичных β-клеток, подсчитанных на группу. E : Количественная оценка общего процента EdU-положительных зрелых (зеленые столбцы) и девственных (красные столбцы) β-клеток между небеременными и беременными мышами G16 в течение 4 дней периода мечения EdU ( n = 5 на группу). Данные анализировали на предмет статистической значимости с помощью двустороннего дисперсионного анализа с поправкой на множественные сравнения с помощью метода Тьюки.Планки погрешностей представляют ± SD. *** P <0,001. нс, не имеет значения.

Отдельно, чтобы определить скорость пролиферации девственных и зрелых β-клеток в условиях острой инсулинорезистентности, мы обработали восемь мышей mIns1 -h3b-mCherry × Ucn3 -EGFP через 6 недель любым PBS ( n = 4) или S961 ( n = 4), антагонист рецептора инсулина (28), с EdU в течение 7 дней (рис. 5 A ). Уровень глюкозы в крови был выше у мышей, получавших S961, чем у мышей, получавших PBS, после 24 часов инфузии S961, как и ожидалось (рис.5 В ). Кроме того, тест на толерантность к глюкозе за 2 дня до лечения S961 не показал разницы в уровне глюкозы в крови (рис. 5 F ), в то время как тест толерантности к глюкозе за 2 дня до окончания лечения показал значительную разницу между мышами, получавшими PBS и S961. (Рис.5 G ). Анализ потока диссоциированных EdU-положительных и EdU-отрицательных девственных и зрелых β-клеток продемонстрировал, что девственные β-клетки значительно увеличили свою суточную скорость пролиферации в ответ на S961 по сравнению с островками, обработанными PBS — точно так же, как зрелые β-клетки.Однако скорости пролиферации зрелых и девственных β-клеток не различались в ответ на любую обработку (рис. 5 C – E ). В целом, наши результаты показывают, что девственные β-клетки увеличивают скорость их пролиферации и, по сравнению со зрелыми β-клетками, в равной степени способствуют удовлетворению повышенного спроса на инсулин, вызванного беременностью или инсулинорезистентностью у мышей.

Рисунок 5

Пролиферация девственных β-клеток увеличивается аналогично пролиферации зрелых β-клеток в ответ на инсулинорезистентность. A : Схема временной шкалы введения EdU мышей mIns -h3b-mCherry × Ucn3 -EGFP, обработанных PBS или S961. B : Ежедневное измерение уровня глюкозы в крови мышей, получавших произвольное питание PBS и S961. Точечные и гистограммы данных потока, иллюстрирующие процент EdU-положительных и EdU-отрицательных первичных и зрелых β-клеток у мышей, обработанных PBS ( C ) и обработанных S961 ( D ). E : Количественная оценка суточной скорости пролиферации зрелых (зеленые столбцы) и девственных (красные столбцы) β-клеток между мышами, обработанными PBS и S961 ( n = 4 на группу).Открытые круги, самки; замкнутые круги, кобели. Данные были проанализированы с помощью двустороннего дисперсионного анализа с поправкой на множественные сравнения с методом Тьюки для статистической значимости. Тест на толерантность к глюкозе перед обработкой S961 ( F ) и после обработки S961 ( G ). Данные были проанализированы с помощью критерия Манна-Уитни на предмет статистической значимости. Все планки погрешностей представляют ± стандартное отклонение. ** P <0,01. мин, минуты; нс, не имеет значения.

Девственные β-клетки представляют собой стабильную, медленно созревающую субпопуляцию β-клеток

Затем мы были заинтересованы в определении потенциала созревания девственных β-клеток.Чтобы ответить на этот вопрос, мы провели импульсный эксперимент, в котором мы пометили как зрелые, так и девственные β-клетки путем скрещивания mIns -CreER (29) с репортерной мышью lsl -mT / mG (30), которая переключается с мембраны. -tdTomato (mT) (отрицательная линия) в мембрану-EGFP (mG) (положительная линия) при индуцибельной экспрессии Cre тамоксифеном. Мы лечили 14 битрансгенных мышей mIns- CreER × lsl -mT / mG тамоксифеном один раз в день в течение пяти дней подряд в течение 4 недель. Мы целенаправленно использовали пероральный желудочный зонд для введения тамоксифена через внутрибрюшинные или подкожные инъекции, так как эти пути введения могут привести к образованию депо, что не способствует исследованиям с отслеживанием пульса (31,32).Мы собрали поджелудочную железу для гистологии через 3 дня ( n = 4) после последнего зондирования тамоксифена для пульсовой когорты или через 3 месяца ( n = 3), 6 месяцев ( n = 3) и 12 месяцев ( n = 4) для когорт погони (рис.6 A ). Положительные по клону девственные и зрелые β-клетки распределяются по островку, как сообщалось ранее (20) (фиг. 8C). Мы предположили, что если девственные β-клетки со временем превратятся в зрелые β-клетки, доля девственных β-клеток, положительных по клонам, будет уменьшаться со временем, а доля девственных β-клеток, отрицательных по клонам, увеличится по мере появления новых девственных β-клеток из не-β предшественников (рис.6 B , сценарий 1). Однако, если созревание не происходит в течение 12-месячного периода преследования, то доля положительных по клонам девственных β-клеток будет оставаться постоянной (фиг. 6 B , сценарий 2). Альтернативно, тот же самый результат может также происходить в сценарии, где девственные β-клетки представляют собой резидентных инсулин-позитивных предшественников, которые самообновляются посредством асимметричного деления клеток (33) (Fig. 6 B , сценарий 3). Девственные и зрелые β-клетки были идентифицированы на основе экспрессии инсулина и Ucn3.Клеточно-положительные и отрицательные по клонам β-клетки определяли по экспрессии mG и mT, соответственно (фиг. 6 C ). Девственные β-клетки были обнаружены в их отличном месте около периферии островка и в ожидаемом среднем соотношении 1,5–2,0% от всех β-клеток (Рис. 6 D ). Количественное сравнение между долей положительных по клону девственных β-клеток за импульс и различными когортами преследования не показало различий в количестве клон-положительных девственных β-клеток с течением времени (рис.6 E ). Этот результат отражает результат, соответствующий сценариям 2 и 3 (рис. 6 B ).

Рисунок 6

Девственные β-клетки представляют собой стабильную, медленно созревающую субпопуляцию β-клеток. A : Схема временной шкалы введения тамоксифена через желудочный зонд для мышей mIns- CreER × lsl- мТ / мГ для эксперимента по отслеживанию пульса. B : Графическая гипотеза, иллюстрирующая три возможных результата эксперимента с отслеживанием импульсов с акцентом на изменения во фракции девственных β-клеток, меченных клонами.В сценарии 1 доля девственных β-клеток, положительных по клонам, уменьшается по мере того, как эти клетки развиваются в зрелые β-клетки, а доля девственных β-клеток, отрицательных по клонам, увеличивается, поскольку новые девственные β-клетки образуются из не β-клеток (предшественники , α-клетки, δ-клетки, протоковые клетки и т. д.). В сценарии 2 девственные β-клетки не созревают в течение 12-месячного периода преследования и, таким образом, доля меченных клонами девственных β-клеток остается той же самой. В сценарии 3 доля меченных клонами девственных β-клеток также остается той же самой, поскольку девственные β-клетки действуют подобно стволовым клеткам и делятся асимметрично, самообновляя пул девственных β-клеток, давая дочерние клетки, которые созревают. C : Репрезентативные изображения иммунофлуоресценции островков мыши в когорте пульса и мыши в когорте 12-месячной погони, окрашенных инсулином (синий) и Ucn3 (белый), чтобы различать девственные и зрелые β-клетки. D : Количественная оценка доли девственных β-клеток в когортах Pulse и Chase (3, 6 и 12 месяцев) ( n ≥ 3 мыши в группе). Значения над каждой полосой указывают общее количество первичных β-клеток, подсчитанных на когорту. E : Количественная оценка среднего процента меченных клонами девственных β-клеток среди импульсных и преследующих когорт ( n ≥ 3 мышей на группу).Открытые круги, самки; замкнутые круги, кобели. Данные были проанализированы на предмет статистической значимости с помощью теста Краскела-Уоллиса с поправкой на множественные сравнения с тестом Данна. Планки погрешностей представляют ± SD. нс, не имеет значения.

Рисунок 8

Отсутствует обнаруживаемый вклад предшественников не-β в поддержание зрелых β-клеток у взрослых мышей. A : Графическая гипотеза, иллюстрирующая два возможных результата эксперимента по отслеживанию импульсов с акцентом на изменения в общих (зрелых) β-клетках.В сценарии 1 не-β-предшественники вносят вклад в общий пул β-клеток, что ведет к постепенному увеличению доли зрелых β-клеток, отрицательных по клону, с течением времени. В сценарии 2 не-β-предшественники не вносят вклад в общий пул β-клеток и, таким образом, доля зрелых β-клеток, отрицательных по клону, остается той же самой. B : Количественная оценка процента зрелых β-клеток, положительных по клону, среди когорт Pulse и Chase ( n ≥ 3 мышей на группу). C : Распределение клон-положительных зрелых β-клеток от каждой отдельной мыши в когортах пульса и преследования ( n ≥ 3 мышей в группе, по крайней мере с 15 островками и в общей сложности> 20 девственных и 800 зрелых β- количество клеток на одно животное).Открытые круги, самки; замкнутые круги, кобели. Данные были проанализированы на предмет статистической значимости с помощью теста Краскела-Уоллиса с поправкой на множественные сравнения с тестом Данна. Планки погрешностей представляют ± SD. нс, не имеет значения.

Девственные β-клетки сохраняются в островках гериатрических мышей

Результат нашего эксперимента с импульсной погоней предполагает, что девственные β-клетки составляют долгоживущую субпопуляцию β-клеток. Поэтому мы были заинтересованы в определении того, насколько долгоживущими являются девственные β-клетки. Ранее мы сообщали о наличии девственных β-клеток в возрасте от 3 недель до 14 месяцев у мышей (20).Чтобы определить, сохраняются ли девственные β-клетки в островках гериатрических мышей, мы количественно оценили долю девственных β-клеток в островках 30-месячных мышей дикого типа ( n = 3). Срезы поджелудочной железы окрашивали инсулином и Ucn3 для маркировки девственных и зрелых β-клеток (фиг. 7 A ). Ucn3-отрицательные девственные β-клетки были легко обнаружены в этих гериатрических островках мыши в несколько меньшей доле (рис. 7 B ) по сравнению с ожидаемым средним соотношением 1,5–2,0% всех β-клеток у взрослых мышей <1 года. старый (рис.3 A – C ), но все еще локализуется на периферии островка (рис. 7 C ). Это подтверждает представление о том, что девственные β-клетки представляют собой долгоживущие подмножества β-клеток, которые сохраняются у мышей до 30-месячного возраста.

Рисунок 7

Девственные β-клетки сохраняются в островках гериатрических мышей 30-месячного возраста в их различных местах на периферии островка и положительно коррелируют с размером островка. A : Двумерное репрезентативное изображение 30-месячного островка мыши дикого типа, иммуноокрашенного глюкагоном (зеленый), инсулином (красный), Ucn3 (белый) и DAPI (синий).Желтые стрелки указывают на отдельные девственные β-клетки, у которых отсутствует экспрессия Ucn3. B : Количественное определение фракции девственных β-клеток от 30-месячных гериатрических мышей. Открытые круги, самки; замкнутые круги, кобели. C : Нормализованное кумулятивное распределение α-клеток (зеленый), девственных β-клеток (красный) и зрелых β-клеток (розовый) в островках 30-месячных мышей ( n = 3 мыши с минимум 10 островков в расчете на одно животное). D : График рассеяния, иллюстрирующий распределение общего количества девственных β-клеток по отношению к размеру островков (измерено по общему количеству β- и α-клеток).Каждая точка представляет собой островок ( n = 193). Анализ взаимосвязей, проведенный с использованием корреляции Спирмена и простой линейной регрессии, дал положительную корреляцию ( r = 0,40, R 2 = 0,1951). E : График разброса, иллюстрирующий распределение процентного содержания чистых β-клеток (измеренное по общему количеству β-клеток) в зависимости от размера островков. Каждая точка представляет собой островок ( n = 193). Анализ отношений с использованием корреляции Спирмена и нелинейной регрессии дал обратную корреляцию ( r = -0.39; R 2 = 0,2925). Островки без первичных β-клеток были исключены из этого анализа.

Число девственных β-клеток коррелирует с размером островка

Мы также хотели оценить, присутствуют ли девственные β-клетки одинаково на всех островках или более распространены в островках определенного размера, в частности, поскольку меньшие островки или кластеры β-клеток имеют предполагается, что они возникают в результате регенерации и поэтому могут непропорционально содержать более молодые β-клетки (34,35). Чтобы решить эту проблему, мы повторно проанализировали ранее опубликованный набор данных о почти 200 островках животных разных возрастных групп.Мы разделили все островки, измеренные по общему количеству α- и β-клеток на площадь поперечного сечения, как маленькие (<50 клеток), средние (50–100 клеток) и большие (> 100 клеток), и нанесли на график количество первичных β-клеток против общего количества островковых ячеек для каждого островка. На основании анализа распределения мы наблюдали положительную корреляцию ( r = 0,40; R 2 = 0,1951) между количеством первичных β-клеток и размером островков, что отражает тот факт, что вероятность наблюдения девственных β-клеток β-ячейка в поперечном сечении островка увеличивается с увеличением островка (рис.7 D ). Однако относительная доля девственных и зрелых β-клеток увеличивается на меньших островках (рис. 7 E ). Эта обратная корреляция ( r = -0,39; R 2 = 0,2925), скорее всего, отражает тот факт, что меньшие островки имеют большее отношение поверхности к объему и, следовательно, содержат непропорциональную долю первичных β-клеток из-за где эти клетки предпочтительно расположены поперек островка.

Ограниченный вклад не-β-предшественников в массу β-клеток взрослого

Наконец, мы также проанализировали наше исследование с отслеживанием пульса (рис.6 A ) с акцентом на пул зрелых β-клеток без особого внимания к первичным β-клеткам. Это позволило нам решить вопрос о том, вносят ли не-β-предшественники вклад в общий пул β-клеток с течением времени у здоровых взрослых мышей. Мы пришли к выводу, что это было важно и ценно, поскольку, по сути, эксперимент, который мы провели для определения оборота девственных β-клеток, также был повторением эксперимента по отслеживанию семенных клонов, проведенного Dor et al. (5), но с тем важным отличием, что эффективность 70% -ной маркировки линий передачи драйвера mIns- CreER (29), который мы использовали, заметно выше, чем 30% -ная эффективность драйвера Rip-CreER (36), используемого в оригинальный эксперимент.Тогда это увеличило бы способность обнаруживать незначительный вклад не-β-предшественников в β-клеточную массу. Мы предположили, что в случае вклада не-β-клеток в поддержание пула β-клеток, доля зрелых β-клеток, положительных по клонам, со временем будет уменьшаться (рис. 8 A , сценарий 1), в то время как в отсутствие такого вклада доля клон-положительных β-клеток будет оставаться постоянной (Рис. 8 A , сценарий 2). При количественном сравнении между импульсной и преследующей когортами мы не наблюдали разведения фракции клон-положительных зрелых β-клеток в течение 12 месяцев нашего исследования (рис.8 B и C ). Этот результат согласуется со сценарием 2 (рис. 8 A ) и с исходными наблюдениями, сделанными Дором и др. (5), но теперь повторяется с драйвером CreER, специфичным для β-клеток, с более высокой эффективностью мечения клонов.

Обсуждение

Здесь мы охарактеризовали способность к пролиферации и потенциал созревания девственных β-клеток, новой популяции незрелых β-клеток, расположенных в пространственно обособленной неогенной нише вблизи периферии островка (20).Во-первых, мы показали, что пролиферирующие β-клетки случайным образом расположены поперек островков и не возникают непропорционально на периферии островков (Рис. 1). В соответствии с этими данными мы затем продемонстрировали, что девственные β-клетки способны пролиферировать (рис. 2) и делать это со скоростью, аналогичной таковой для зрелых β-клеток с того же островка во всех исследуемых нами возрастах (рис. 3). ). Ежедневная скорость пролиферации девственных β-клеток также следовала за возрастным снижением, которое ранее наблюдалось другими в скорости пролиферации β-клеток (рис.3). Мы также продемонстрировали, что скорость пролиферации девственных β-клеток можно стимулировать во время беременности (рис. 4) или при экспериментально индуцированной инсулинорезистентности (рис. 5), но что скорость их пролиферации в любом из этих состояний остается статистически неотличимой от таковой зрелых клеток. β-клетки.

Затем мы показали, что доля девственных β-клеток, положительных по клонам, остается постоянной в течение относительно большого периода погони в год (рис.6), что указывает на то, что девственные β-клетки составляют стабильную субпопуляцию (рис.7), который не подвергается быстрому обороту, чтобы способствовать поддержанию массы взрослых β-клеток (Fig. 6 B , сценарий 2). Однако, основываясь на нашем эксперименте по отслеживанию клонов, мы не можем исключить сценарий, при котором девственные β-клетки составляют резидентную стволовую клетку, подобную предшественнику, которая вносит свой вклад и самообновляется посредством асимметричного деления клеток (Рис.6 B , сценарий 3). . Кроме того, поскольку наши результаты были сосредоточены только на физиологическом состоянии с использованием здоровых мышей, мы не учли возможность того, что девственные β-клетки могут быть неспособны к созреванию из-за отсутствия важных факторов транскрипции, таких как MafA, и продолжающегося присутствия другие факторы, такие как MafB, хотя мы знаем, что отсутствие Ucn3 само по себе не препятствует созреванию β-клеток (37).Из-за очевидного отсутствия созревания девственных β-клеток в течение длительного периода преследования, положительные по клонам девственные β-клетки, которые мы наблюдали в наших когортах преследования, вероятно, уже присутствовали во время импульса на 4-й неделе и, следовательно, вероятно, представляют собой долгоживущие, стабильная субпопуляция β-клеток, формирующаяся в перинатальном периоде жизни. Эксперименты по изотопному мечению (38) должны подтвердить, что девственные β-клетки на периферии островков у старых мышей представляют собой долгоживущие β-клетки, которые никогда не созревают полностью.

Хотя мы изначально намеревались определить потенциал созревания только первичных β-клеток, мы пометили все β-клетки клонами, используя mIns -CreER в нашем эксперименте с импульсной погоней. Таким образом, это позволило нам также оценить потенциальный вклад не-β-клеток в пул β-клеток с течением времени. При этом мы не обнаружили значительного разведения пула клон-положительных зрелых β-клеток (рис. 8). Наш вывод согласуется с исследованием, проведенным Dor et al. (5), которые пришли к выводу, что саморепликация является основным механизмом, ответственным за поддержание массы β-клеток, с тем важным отличием, что драйвер CreER, специфичный для β-клеток, который мы использовали здесь, имеет более высокую эффективность и, следовательно, с большей вероятностью обнаруживают незначительный вклад не-β-предшественников в массу взрослых β-клеток (рис.8 A , сценарий 2). Это наблюдение контрастирует с сообщениями о трансдифференцировке β-клеток и присутствием потенциальных островковых предшественников, способных генерировать новые β-клетки, выдвинутыми некоторыми, включая нас (14,16,19,20). Некоторые исследования показывают отсутствие регенерации β-клеток из любого источника, включая популяцию β- или не-β-предшественников, после лечения стрептозотоцином. Напротив, другие демонстрируют выздоровление от опосредованного стрептозотоцином диабета у мышей после приживления органоидов, образованных из предполагаемых ProCr-положительных островковых клеток-предшественников (19).Однако наши данные по отслеживанию клонов не выявили вклада таких предшественников, не являющихся резидентами β-островков, в пул зрелых β-клеток у здоровых мышей. Эти расхождения в наблюдениях подчеркивают сложность клеточных сигналов, которые могут быть необходимы, чтобы вызвать ответ факультативных стволовых клеток и предшественников в физиологических условиях. В заключение, наши наблюдения подтверждают парадигму, согласно которой саморепликация β-клеток является основным источником взрослых β-клеток у мышей без непропорционального вклада девственных β-клеток.Это оставляет открытыми вопросы о важности этой отдельной и легко идентифицируемой субпопуляции девственных β-клеток для общей судьбы и функции β-клеток и почему они так отчетливо располагаются на периферии островков.

Ограничения исследования

Принимая во внимание возможные затруднения, такие как увеличение массы β-клеток из-за присутствия минигена гормона роста человека у мышей mIns -CreER (39), мы использовали только мышей, которые все были трансгенными. для mIns -CreER, что устраняет любые затруднения, связанные с дифференциальным присутствием mIns -CreER и связанных с ним трансгенных элементов.Идеальным методом для изучения потенциала обновления первичных β-клеток было бы использование специфичного для девственных β-клеток Cre драйвера для выборочного клонирования меток только этих клеток и отслеживания их во времени. Однако в настоящее время такого инструмента не существует. Вместо этого мы использовали лучший экспериментальный подход, доступный для решения этого важного вопроса. Наши данные приводят нас к выводу об отсутствии детектируемого вклада предшественников не-β-клеток, включая девственные β-клетки, в массу β-клеток у взрослых мышей в физиологических условиях.Но поскольку маркировка драйвера mIns -CreER эффективна на 70%, это лишает нас возможности окончательно исключить незначительный вклад потенциальных не-β-предшественников в общий пул β-клеток. Кроме того, наше исследование не различает девственные и дедифференцированные β-клетки, в которых также отсутствует экспрессия Ucn3, хотя последние не ограничиваются периферией островков в отличие от девственных β-клеток. Формальное различие между девственными и дедифференцированными β-клетками потребовало бы трассировки клонов с использованием драйвера Ucn3 -Cre, который несовместим с использованием mIns -CreER в нашем эксперименте с отслеживанием импульсов.

Информация о статье

Благодарности. Авторы благодарят членов лаборатории UC Davis Huising Lab Рию Бансал за помощь с ручной количественной оценкой клеток у гериатрических мышей и Джессику Л. Хуанг за помощь в представлении данных на рис. 1 B и C . Авторы также благодарны Бриджит Маклафлин и Джонатану ван Дайку из лаборатории общих ресурсов Калифорнийского университета в Дэвисе за отличную техническую помощь в наших экспериментах по проточной цитометрии и Скотту Кларку из Thermo Fisher Scientific за техническую помощь в оптимизации использования Click-iT Plus. Комплекты EdU.Гериатрические ткани щедро предоставила доктор Селин Рьерра (Калифорнийский университет в Беркли).

Финансирование. Исследование, описанное в этой статье, было поддержано грантами JDRF (CDA-2-2013-54) и Американской диабетической ассоциации (1-19-IBS-078). S.L. была поддержана Программой стипендий для аспирантов Национального научного фонда (NSF) (1650042), программой обучения UC Davis в области молекулярной и клеточной биологии (частично финансируемой грантом T32-GM007377 Национальных институтов здравоохранения) и UC Davis NSF Bridge to Докторантура (1612490).Эта работа также была поддержана Лабораторией общих ресурсов Калифорнийского университета по проточной цитометрии Дэвиса при финансовой поддержке Национального института рака (P30 CA093373) и награды Национального института здоровья S10 (OD018223). NNC0069-0961 был щедро предоставлен компанией Novo Nordisk Compound Sharing.

Двойственность интересов. О потенциальных конфликтах интересов, относящихся к этой статье, не сообщалось.

Авторские взносы. M.O.H. и С. способствовал концептуализации, визуализации и привлечению финансирования.S.L., J.Z. и T.v.d.M. участвовал в исследовательских исследованиях, формальном анализе и обработке данных. С.С., М.Ф.Ф. и Д.Р.Г. способствовал исследовательскому расследованию. J.Z. внесла свой вклад в новую методологию. S.L. написал оригинальный черновик рукописи. M.O.H. способствовал формальному анализу, обработке данных, рецензированию и редактированию рукописей. M.O.H. отвечал за надзор и администрирование проекта. M.O.H. является гарантом этой работы и, как таковой, имеет полный доступ ко всем данным в исследовании и берет на себя ответственность за целостность данных и точность анализа данных.

Предварительная презентация. Части этого исследования были представлены в виде тезисов на заседании группы по изучению островков Западного региона (WRISG) 2019 г., Виктория, Британская Колумбия, 9–11 октября 2019 г., 44-й ежегодной конференции по исследованиям биологических наук Западного побережья (WCBSUR), Университет Сан Диего, Калифорния, 6 апреля 2019 г., и 30-я Ежегодная конференция студентов по исследованиям, стипендиям и творческой деятельности, Калифорнийский университет в Дэвисе, 26–27 апреля 2019 г.

  • Получено 29 июня 2020 г.
  • Принято 25 января 2021 г.
  • © 2021 Американская диабетическая ассоциация

12 лучших систем хранения велосипедов 2021 год — приведите в порядок свои велосипеды

Не хватает места? Вот несколько способов хранения велосипедов, чтобы их не всегда можно было сбить в коридоре.

  • Велосипеды, прислоненные к стене, всегда мешают, особенно в узких коридорах и тому подобном; Эти системы хранения велосипедов включают в себя стойки, крючки и подставки, позволяющие приручить непослушные велосипеды

  • Ваш выбор варьируется от простых крючков для покупки фунта в магазинах за фунт до мебели для хранения велосипедов, которая не будет неуместной в современной квартире

  • Вертикальные стойки для нескольких велосипедов — хороший способ освободить место на полу и уменьшить количество хлопот со стороны соседей по дому и близких, которым надоело бить лодыжками о педали

  • Не разрешено проделывать дыры в стене? Посмотрите на гравитационные стойки и стойки, которые опираются на пол и потолок

В комплекте: лучшие крючки, стойки и стойки для хранения велосипедов на 2021 год

Велосипеды неудобно хранить.Если у вас нет сарая или гаража, и вы не хотите оставлять свои велосипеды на улице под дождем, вам нужно как-то спрятать их в доме. С торчащими педалями и рулем просто ставить их в коридоре — плохая идея; они зацепятся, их опрокинут и вообще будут раздражать.

Вам понадобится стойка или подставка, на которой можно будет держать велосипед, желательно не на полу. Выделяют основных двух типов: отдельно стоящие стеллажи и настенные стеллажи.

Если вы живете в съемном жилье, возможно, вам не удастся прикрутить стойку к стене, и здесь пригодятся отдельно стоящие стойки.Это либо «гравитационные стойки», которые прислоняются к стене, либо стойки «от пола до потолка», которые расширяются, чтобы закрепиться вертикально. Гравитационная стойка обычно вмещает два велосипеда, один низкий и один высокий, в то время как некоторые стойки от пола до потолка вмещают до четырех велосипедов. Есть также отдельно стоящие стойки, на которых можно разместить до четырех велосипедов, хотя для них требуется больше места на полу

Если у вас свои стены (или у вас терпеливый домовладелец), у вас есть большой выбор вешалок для одного велосипеда, которые крепятся на стене, от простых крючков до красиво оформленных молдингов, в которых также есть место для мелочей. как огни и перчатки.

Даже если у вас есть навес или гараж для хранения велосипедов, многие из этих устройств по-прежнему полезны для уменьшения занимаемой велосипедами площади.

Три короля: самые лучшие системы хранения велосипедов

Лучшее место для хранения велосипедов: петля Feedback Sports Velo Hinge — 24,04 фунта стерлингов

Секретный «соус» Velo Hinge — это его способность поворачивать велосипед на петлях (ни в коем случае не говорите, что отдел маркетинга FBS не зарабатывает своей корочки). Крючок с пластиковым покрытием выдвигается из настенной пластины, ваша передняя шина опирается на пластину, и все это поворачивается от перпендикуляра к настолько большому левому или правому краю, насколько позволяет ваш руль.В результате получается велосипед или куча велосипедов, которые высовываются только до самого широкого руля, который есть в вашем парке.

Если вам нужно хранить несколько велосипедов, независимо от их размера, типа или количества, весом до 22,7 кг, Velo Hinge поможет вам в этом. По мере роста / изменения вашего автопарка просто переставляйте крюк и бамперы в соответствии с вашими требованиями. Вероятно, это последний настенный крючок для велосипеда, который вам когда-либо придется покупать.

Прочтите наш обзор петли Feedback Sports Velo Hinge

Лучший домашний стеллаж: Gear Up OakRak от пола до потолка — 179 фунтов стерлингов.00

Крепление для велосипедов GearUp OakRak от пола до потолка легко собрать, хорошо выглядит и является отличным способом хранить до четырех велосипедов в вашем доме или квартире, где они находятся в целости и сохранности. Что отличает OakRak, так это красиво отделанная деревянная конструкция, которая делает его больше похожим на предмет мебели, чем на обычную стойку для мастерских / промышленных предприятий.

Сделанный в США из американского красного дуба, OakRak представляет собой сборку чередующихся деревянных балок, которые соединяют пол и потолок, поэтому, если вы арендуете, вы можете установить его, не сверля отверстия в стенах.Вертикальные части скрепляются шпильками с резьбой и мебельными гайками. По бокам крепятся стальные крючки с толстым покрытием, на которых можно подвешивать велосипеды.

Сборка проста, с четкими инструкциями. Все винты вместе с прилагаемым шестигранным ключом на 4 мм, за исключением верхней части, для которой вам понадобится крестовая отвертка.

Прочтите наш обзор Gear Up OakRak Floor-to-Ceiling
Найдите дилера Gear Up

Еще девять отличных систем хранения велосипедов

Feedback Sports Velo Wall Post — 29 фунтов стерлингов.62

Если вы согласны с тем, что лучше всего хранить велосипед на полу и у стены, то, возможно, самый простой способ это сделать с помощью настенной стойки Feedback Sports Velo. Он также великолепно сделан, и его действие при складывании настолько плавное. И это удобно и для других вещей.

Столб Velo Wall Post — это просто столб, который торчит из стены для вашего вело. Вы вешаете на него седло велосипеда, дело сделано. По цене полдюжины сортов кофе и пирожных вы получаете инженерные решения уровня Isambard Kingdom Brunel с функциями защиты вашего велосипеда от повреждений — случайных или преднамеренных.

Прочтите наш обзор Feedback Sports Velo Wall Post

Cycloc Endo — 40,79 фунтов стерлингов

Cycloc Endo продолжает стремление марки к стильным, но практичным решениям для сохранения гордости и радости в помещении, не нарушая правил охраны труда и техники безопасности, не умаляя декора и не вызывая острой домашней дисгармонии.

Endo — это шарнирный крюк, который может быть установлен на консолях для приспособления к разным диаметрам обода и шин и поддерживает велосипеды с шинами до двух.3 дюйма в его просторных прорезиненных каналах, защищающих стены от неприглядных следов.

Прочтите наш обзор Cycloc Endo

Feedback Sports Velo Wall Rack 2D — £ 45.98

Благодаря регулируемым рычагам Velo Wall Rack 2D подходит для узких шоссейных велосипедов или широких рулей для горных / гибридных велосипедов, а также для всего разнообразия форм и выступов современных велосипедных рам.

Простая настройка шестигранного ключа на 3 мм (входит в комплект) в одной из шести головок болтов сбоку и на рукоятках занимает всего минуту, чтобы получить более или менее точное место, в зависимости от того, есть ли у вас партнер, который немного уступит немного руководства.

Плечи заканчиваются прорезиненными V-образными чашечками, ступенчатыми для обеспечения плотного прилегания даже самых необычных профилей. Преимуществом V-образного профиля является то, что при прокладке кабеля под трубкой он будет проходить сквозь нее, не прижимаясь к нижней стороне трубки — даже до традиционных диаметров стальных трубок около отметки 25–26 мм.

Прочтите наш обзор Feedback Sports Velo Wall Rack 2D

Готовьтесь к нестандартной работе — 47,84 фунтов стерлингов

Off-The-Wall Вертикальный блок для двух велосипедов

Gear Up делает именно то, что он говорит, и делает это очень хорошо по разумной цене.Вы можете использовать его в доме или, если вы установили стеновой анкер типа егеря в целях безопасности, он также отлично подходит для гаражей и подобных кирпичных хозяйственных построек.

У нас есть прочная конструкция с двойным крюком, сваренная методом сварки MIG, в комплекте с колесными направляющими, которые надежно удерживают велосипеды на расстоянии от царапин. Съемная корзина из проволочной сетки поглощает крышки, перчатки, насосы и другие аксессуары, которые в противном случае могли бы остаться необузданными и привести к беспорядку и ссорам в доме. Качество сборки в целом очень хорошее — сварка местами немного искусная, но до 100 фунтов полезной нагрузки легко.Порошковое покрытие также лучше, чем мы ожидали от серийно выпускаемых устройств.

Прочтите наш обзор Gear Up Off-the-Wall
Найдите дилера Gear Up

Гравитационная стойка

Gear Up Lean Machine — 49,99 фунтов стерлингов

Багажники

Gravity очень удобны, если у вас есть свободная внутренняя стенка для хранения двух велосипедов. Стопы находятся сразу за центром тяжести велосипеда, поэтому вся конструкция остается стабильной, пока ничто не толкает ее слишком сильно.

На рычаги нанесено покрытие, защищающее лакокрасочное покрытие вашего велосипеда, и их можно перемещать независимо, так что ваш велосипед будет стоять ровно и выглядеть аккуратно.

Найти дилера Gear Up

Pro Bike Tool Настенная стойка для 3 велосипедов — £ 59,99

Настенная стойка для велосипедов Pro Bike Tool 3 — это удобное универсальное решение для хранения нескольких велосипедов, которое поможет вам сэкономить место на полу. Это немного более дорогой путь, чем покупка отдельных крючков для велосипеда, но конечный продукт в целом намного лучше.

Состоящая из аккуратно выглядящей алюминиевой перекладины с тремя крючками, которые скользят по направляющей, стойка PBT предназначена для установки высоко (не менее 180 см от земли), чтобы прикрепленные к ней велосипеды висели вертикально.Стеллаж можно использовать в гараже, сарае или даже внутри вашего дома, и его можно установить на гипсокартон (при условии, что он поддерживается деревянными шпильками) или что-то более прочное, например, каменная кладка или бетон.

Используемые крюки довольно прочные и подходят для шин шириной до 5 дюймов, поэтому есть много возможностей, чтобы повесить практически любой тип велосипеда, который вы хотите, и если у вас серьезный случай N + 1, есть версия это займет шесть велосипедов.

Прочтите наш обзор настенной стойки для 3 велосипедов Pro Bike Tool

Topeak Two Up — 142 фунта стерлингов.49

Этот отдельно стоящий блок вмещает до четырех велосипедов. Он поставляется с двумя наборами крючков, а дополнительные услуги стоят 14 фунтов стерлингов. Topeak говорит, что он вмещает до 72 кг велосипедов, так что все будет в порядке, если в вашем парке нет очень дешевых электронных велосипедов.

Ножки штатива, выполненные в виде подставки, позволяют складывать и достаточно прочны, чтобы их можно было использовать для легкого обслуживания.

Найти дилера Topeak

Saris Parking Cycle Glide — 244,99 долларов США

Если у вас высокие потолки и довольно легкие велосипеды, стоит присмотреться к этому компактному шкафу для хранения вещей.Вы подвешиваете велосипеды вверх ногами на крюки, а затем можете сдвинуть их вместе по рельсам.

Если вы хотите, чтобы велосипед оказался глубоко в куче, вы можете просто сдвинуть другие с дороги. Из коробки потребуется четыре велосипеда, а есть надстройка для размещения еще двух.

Найти дилера Saris

Ознакомьтесь с полным архивом обзоров систем хранения велосипедов на road.cc

Кафе мудрость: считыватели road.cc о системах хранения велосипедов

Биггус-Диккус: Лучшее и дешевое решение, которое я нашел, — это купить у Amazon большие велосипедные крючки с пластмассовым покрытием, прикрутить их к балкам потолка в гараже и подвесить велосипеды к потолку.У меня в гараже вот так висят 4 мотоцикла, и он их убирает. Если работаешь рядом с ними, надо только следить за головой…

horrovac: Я сделал свой собственный из каких-то деревянных обрезков, которые у меня были. Две штанги, прикрепленные к стене, чтобы велосипед мог стоять, и простой крючок, чтобы удерживать его, достаточно длинный, чтобы педаль не касалась стены в крайнем верхнем положении. Если бы я строил его сейчас, я бы сделал крюк хоть немного длиннее (чтобы положение рукоятки не было критичным) и шарнирным (чтобы я мог зацепить его за подседельный штырь на разных велосипедах или избежать освещения, прикрепленного к подседельный штырь).

dst: Я хочу что-то подобное, но не могу найти ничего похожего в Интернете. На фото — продукт компании Stowaway, которая, насколько я могу судить, сейчас не существует. Кто-нибудь знает что-нибудь подобное, где можно горизонтально повесить велосипед на потолке?

[The Stowaway был проектом на Kickstarter 2015 года, который не достиг цели финансирования. Образно названный плоский велосипедный подъемник концептуально похож, но использует гидропневматическую систему, чтобы поднять ваш велосипед на место.Это 260 фунтов стерлингов от Amazon. — JS]

DaSy: На данный момент у меня есть только один из них, я просто пытаюсь оправдать двойную цену на медную и кожаную версию для следующего

Получил отсюда: Крепления для велосипедов Trophy

Симонтук: Увидев их на байк-шоу Excel 2016, я купил эти стойки для палача. Они прислали мне один на проверку, и он мне так понравился, что я купил еще один, чтобы повесить оба велосипеда. Это означает, что семейные городские велосипеды живут в переулке (который имеет гофрированную пластиковую «крышу» и заперт, я не животное), но они не только являются хорошим подвесным решением, которое хорошо поддерживает раму.Они также защищают ваш велосипед.

jaysa: Я не получу здесь оценок за стиль, но наши велосипеды подвешены на стальных крючках с пластиковым покрытием, ввинченных в балки потолка. Стоит около пятерки за лот. Просто поднимите переднее колесо на крючок, и все готово.

Может быть какое-то домашнее возражение, и вам нужна балка в правильном месте, и ее трудно прикрепить к стене, в остальном это просто и красиво.

caw35ride: +1 для SteadyRack.

У меня есть 3 пары дорожных велосипедов и один МТБ из стены небольшого подсобного помещения.Очень крепкий, я выбрал вариант «Fat Rack» для MTB, чтобы справиться с шинами большого размера. После небольшого тщательного измерения, поместив MTB посередине, у меня теперь есть 3 велосипеда, занимающих пространство чуть более двух (общая сохраненная ширина: 2 дорожных бруса плюс рама MTB).

Я ими очень доволен.

mista-tee: Прочитал эту статью много лет назад, но наконец добрался до фотографии моего решения. У меня есть гараж с открытыми стропилами крыши, поэтому решение было подняться вверх.У меня там висят три шоссейных велосипеда, и они поднимаются достаточно высоко, чтобы верхняя / верхняя дверь скользила под ними. Они подвешены на шкиве блокирующего / захватного типа, соединенном с 10-миллиметровым стержнем с резьбой. Он убирает их с дороги и не требует значительных усилий, чтобы поднять их. Он также служит очень грубой подставкой для работы.

Мне просто нужно найти решение для оставшейся части n + 1 велосипедов.

SDK-R: Я использую настенные крючки в своем гараже

bashthebox: Надеюсь, для меня нет ничего необычного в том, чтобы упомянуть велосипедные стойки, которые я проектирую, производю и совсем недавно начали продавать — моды, если мне не подходит публиковать это, пожалуйста, скажите.[Все в порядке. Хорошо сделано! — JS]

Это BikeBlock, который я изначально сделал, потому что мне не очень нравилось какое-либо решение для подвешивания велосипеда в моем доме. Обожаю изделия из дерева, сделал прототип. Мне это нравилось, друзьям это нравилось — возможно, самое главное, моему партнеру это нравилось, и он перестал раздражаться из-за моего велосипеда, приподнятого в коридоре.

Прошло время, и в конце концов я вытащил палец и исследовал лазерную резку, позволяющую производить мелкие партии — и вот мы.Он сделан из слоя балтийской березы, вырезан лазером, собран и обработан вручную в моей крошечной мастерской в ​​Южном Лондоне.

Загляните на www.themoderncarpenter.com для получения дополнительной информации — на данный момент это крайне редкий сайт, но со временем появится больше битов и бобов, некоторые из которых будут посвящены велосипедной тематике, а некоторые нет.

Peowpeowpeowlasers: У меня есть пара настенных креплений Cycloc, которые работают очень хорошо. Единственным недостатком является то, что если вы поменяете свой велосипед (у многих из нас их несколько) на другой с другой верхней трубой, он не всегда будет висеть прямо.Мои велосипеды, как правило, имеют горизонтальные верхние трубы, но мои зимние кроссовки из карбона имеют компактную раму и поэтому будут сидеть под углом.

oddbydefault: Потратив несколько месяцев на поиски, я решил сделать решительный шаг с 4 Steadyracks.

Они действительно потрясающие — поворотные, как у Velo Hinge, но делают то, что не делают никакие другие параллельные крючки — держат байк за шину, а не за обод и спицы. Зацепление за спицы может привести к повреждению, особенно если колесо оторвано от пола, а также затруднить зацепление / отцепление.

Я выбрал стойку Fender, которая скользит под полными брызговиками, а также установил шины МТБ 2.2inch 29er. Абсолютная победа.

Мой симпатичный велосипед висит на регулируемом подвесе Ibera. Определенно лучше, чем стеллаж Velo Wall. Опять же, это может соответствовать геометрии шоссейного велосипеда, а также наклонным рамам MTB.

fat buddha: Я поддержал Clugs на Kickstarter и был немного разочарован. У меня есть Topeak 2 Up с 2 дополнительными рычагами, на которых держатся 4 велосипеда, и он отлично справляется, если кому-то это интересно, но он хотел, чтобы Clugs повесили на стену мои запасные колеса.Основная проблема с Clug заключается в том, что мои колеса 23C просто выпадают, если Clug установлен на стене — ручка не находится в центре обода, так как колесо немного опускается при установке, поэтому сила тяжести каждый раз побеждает трение. Однако теперь я установил их под полкой, и они отлично работают, так как здесь они удерживают центр обода, а ширина шины достаточна, чтобы удерживать сцепление с землей. Хорошая идея, которая может быть намного лучше, если немного поработать.

DaveE128: У меня две ужасные стойки «Gear Up»

Исходя из этого, я бы больше не стал прикасаться к вещам для хранения велосипедов Gear Up с удочкой.Мне пришлось согнуть его в тисках, чтобы он не упал со стены, как только велосипед коснется его (конструктивный или производственный дефект означал, что прилагаемый винт не входил в стену достаточно глубоко, чтобы обеспечить надлежащий захват!) Это действительно гибкий, заметно прогибается даже под легким байком, и он никогда не складывался, когда не использовался, как обещал — он падает прямо назад в открытом состоянии! И в довершение всего, они даже не включили в комплект поставки сырые заглушки необычного размера!

Мне гораздо больше нравятся примерно похожие стойки, которые я получил от Halfords.

Они прочные, включая необходимые крепления для установки в кирпичные / блочные стены, и правильно складываются.

(Не могу поверить, что рекомендую Халфордов для чего-нибудь !!)

Sports Velo Hinge с обратной связью выглядит отличной идеей, но было бы неплохо, если бы она была дешевле. Для некоторых велосипедов это складывается.

cjwebb: Я использую что-то похожее на этот двойной крючок Smith and Locke Mid-duty. Крючки сидят по обе стороны от выноса, а седло опирается на стену, а велосипед находится прямо над землей (так хорошо зимой с брызговиками).Стабильное хранилище за несколько фунтов.

fustuarium: У меня два Клага, и хотя они красивы, минималистичны, я ни одним из них не пользуюсь. Стоит отметить, что, как сейчас говорится на веб-сайте (а несколько лет назад этого не было), они не могут выдержать вес велосипеда от пола. Задние крылья полной длины означают, что вы не можете их использовать.

Изобутилнитрит — обзор

Инфракрасная спектроскопия

Инфракрасная (ИК) спектроскопия — непревзойденный универсальный метод определения класса соединений, присутствующих в образце.Например, очень легко идентифицировать волокна на общей основе, такой как акрил, нейлон и полиэфиры, или краски на общей основе, такой как алкиды, акрилы, уретаны и нитроцеллюлоза. С появлением компьютеризированных спектральных баз данных и хемометрии теперь можно расширить эту технику, чтобы разрешить подродовую дискриминацию. Однозначная идентификация конкретного вещества возможна, если образец не является смесью. Однако, поскольку аналогичные вещества в пределах определенного класса имеют аналогичные функциональные группы, часто бывает трудно различить вещества в пределах класса, особенно если присутствуют смеси членов класса. На рисунке 1 приведены спектральные данные для трех распространенных пластификаторов на основе фталатного эфира. Еще один пример ограничения техники — дифференциация красок в классе алкидных.

Рис. 1. Инфракрасные спектральные данные для трех пластификаторов на основе сложного эфира фталевой кислоты: (а) диметилфталат; (б) диизооктилфталат; и (c) дигексилфталат.

ИК-спектроскопия может использоваться для выявления структурной информации, которую трудно или невозможно получить с помощью других методов.Одна из очень полезных областей — это характеристика химических изомеров. Например, диастереоизомеры эфедрина и псевдоэфедрина трудно различить с помощью масс-спектрометрии, и в зависимости от используемой стационарной фазы они могут демонстрировать идентичные удерживания в газовом хроматографе. Поскольку волновые числа поглощения зависят от геометрии молекулы, ИК-спектроскопия может различать диастереоизомеры (например, эфедрин и псевдоэфедрин), позиционные изомеры ароматических веществ (например, различные изомеры диметоксиамфетамина или триметилбензола), другие стереоизомеры (например,g., кокаин, аллококаин, псевдококаин и псевдоаллококаин) и изомерные функциональные группы (например, бутилнитрит, изобутилнитрит и втор-бутилнитрит). Незначительные химические изменения могут привести к значительным изменениям в ИК-поглощении. Например, участок N – H в аминных солях лекарственных средств находится между 2500 и 3000 см -1 , тогда как участок N – H в их свободных основаниях находится значительно выше 3000 см -1 .

ИК-спектроскопия может предоставить информацию, касающуюся общего состава образца, в отличие от хроматографических методов, которые обычно требуют стадии экстракции и имеют ограничения из-за летучести и растворимости.Таким образом, такие методы могут предоставить только частичную информацию об образце. Например, при исследовании краски ИК-спектроскопия может предоставить информацию о полимерном связующем, а также о неорганических наполнителях и пигментах. На рис. 2 показан спектр образца краски, а также спектры каолина и кремнезема. Спектральные особенности, обусловленные этими минералами, а также полимером, очевидны в спектре краски. Неорганические галогениды практически прозрачны для ИК-излучения; поэтому невозможно сделать вывод о наличии, например, поваренной соли или бромида калия в образце.Металлы и некоторые их оксиды также не дают полезных данных.

Рис. 2. Инфракрасная спектроскопия пленок краски позволяет идентифицировать неорганические соединения, а также полимерное связующее. В этом примере ни связующее, ни неорганические вещества не доминируют в спектре. а) лакокрасочная пленка; (б) инфракрасный спектр диоксида кремния; и (c) инфракрасный спектр каолина.

Однако, хотя количественные измерения возможны с использованием ИК-спектроскопии, они трудны. Во-первых, предел обнаружения одного вещества в присутствии другого составляет около 5%.Таким образом, ИК-спектроскопия не является хорошим методом для обнаружения или идентификации следов сополимеров, остаточных растворителей, пигментов с низким уровнем содержания, некоторых добавок в образцах полимеров (например, волокон или красок), производственных примесей или следовых примесей в запрещенных наркотиках. Во-вторых, в количественной ИК-спектроскопии необходимо учитывать матричный вклад. Следовательно, матрица должна быть хорошо охарактеризована. Например, относительно точный количественный анализ неизвестных смесей героина с сахарозой может быть выполнен с использованием набора калибровочных данных, включающих различные известные смеси героина с сахарозой, и, если в смеси нет других веществ, кроме уровня героина в сахарозе. глюкоза не может быть определена с использованием данных калибровки героин – сахароза.

Присутствие в смеси различных веществ может маскировать или замаскировать абсорбцию других компонентов. На рис. 3 показан спектр, полученный для образца цветного вещества (очевидно, электрической изоляции провода), снятого с пары кусачков, которые, как предполагается, использовались для отключения охранной сигнализации. Спектральные особенности, обусловленные полимером (поливинилхлоридом), практически отсутствуют; большинство пиков связано с пластификатором (сложным эфиром фталевой кислоты или их смесью) и кальцитом.Для сравнения извлеченных пластиковых чипов и изоляции, снятой с провода в системе охранной сигнализации, ИК-спектроскопия особенно неудовлетворительна. Спектральные характеристики из-за важного полимерного компонента маскируются пиками из-за добавок.

Рис. 3. Инфракрасный спектр, записанный с небольшого куска пластмассовой электрической изоляции. Указанные пики связаны с пластификатором или кальцитом. В этом спектре преобладают неорганические наполнители; поэтому полимерное вещество (поливинилхлорид) очень трудно идентифицировать.

ИК-спектроскопию можно проводить на микроскопических образцах (размером до 10 мкм 2 ) с помощью ИК-микроскопа. Этот инструмент представляет собой просто устройство, которое конденсирует ИК-луч от его стандартного размера (обычно около 10 мм) до гораздо меньших размеров (около 0,18 мм). Эта задача решается с помощью микроскопа, который также используется для просмотра образца с большим увеличением и его точного позиционирования в луче. Этот метод получил название ИК-микроскопии или, точнее, ИК-микроскопии.

ИК-микроскопия — это обычный метод, используемый для анализа небольших образцов краски (например, дорожно-транспортных происшествий, взлома и проникновения), отдельных текстильных волокон (свидетельство контакта), твердых частиц (остатков взрывчатых веществ, таких как нитрат аммония, бездымные порошок и т. д.) и концентрированные экстракты лекарственных средств с низкой дозировкой (например, экстракт из дозы диэтиламида лизергиновой кислоты (ЛСД), испаренный до микроскопического пятна). С помощью ИК-микроскопа можно записывать спектры нескольких нанограмм материала.

На практике ИК-микроскопия мало отличается от ИК-спектроскопии. Подготовка образцов немного более утомительна, так как манипуляции необходимо проводить с помощью микроскопа. В большинстве случаев необходимо принять меры для уменьшения толщины образца примерно до 10–30 мкм, в противном случае в спектре будут заметны плохие артефакты. Как и в случае с любым другим спектроскопическим методом, однородность образца является важным вопросом. Например, в некоторых образцах красок размер гранул некоторых неорганических наполнителей может быть относительно большим: в микроскопическом масштабе некоторые образцы довольно неоднородны.Несмотря на то, что с помощью ИК-микроскопа можно увидеть очень маленькие объекты (<10 мкм), дифракция ИК-луча препятствует получению высококачественных спектров. Описание дифракции и ее влияния на микроскопию выходит за рамки этого текста; читатель может найти полезные ссылки в библиографии.

Многое из вышеперечисленного описывает измерение поглощенного ИК-излучения, проходящего через образец. Есть два других метода, широко используемых в лабораториях судебной экспертизы; Как в спектроскопии внутреннего отражения (IRS, иногда называемой спектроскопией ослабленного полного отражения), так и в спектроскопии диффузного отражения, ИК-излучение взаимодействует с поверхностью образца, а не проходит через него.

В IRS инфракрасный луч отражается внутри специального кристалла, который находится в контакте с образцом. Некоторые компоненты ИК-электромагнитного излучения выходят за пределы кристалла и взаимодействуют с поверхностью образца на глубину около 1 мкм. Поглощение ИК-излучения образцом регистрируется как спектр IRS. Физика IRS означает, что поглощение более длинных волн (меньшие волновые числа) усиливается по сравнению с поглощением более коротких волн.

В спектроскопии диффузного отражения ИК-луч направляется на тонко измельченный образец.ИК-луч отражается как от поверхностного слоя, так и от частиц под непосредственной поверхностью. Аналогично другим методам ИК-излучения, поглощение ИК-излучения образцом регистрируется как спектр диффузного отражения. Обратите внимание, что иногда используется аббревиатура DRIFTS (ИК-спектроскопия с преобразованием Фурье с диффузным отражением), где преобразование Фурье относится к типу спектрометра, используемому для сбора ИК-спектра.

.

Previous PostNextNext Post

Добавить комментарий

Ваш адрес email не будет опубликован. Обязательные поля помечены *